细胞：HFLS-RA细胞 中文名称：人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 生长特性：贴壁细胞 培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作） 1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min） 2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。 3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 
内毒素所致SIRSMODS小鼠脾细胞损伤的形态学观察 目的应用大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)腹腔注射制备小鼠全身炎症反应综合征/多器官功能失常综合征(SIRS/MODS)模型. 方法: 用免疫组化的方法检测了Bcl-2的表达. 结果随LPS作用时间的延长,脾损伤逐渐加重.HE染色中,生发中心和动脉周围淋巴鞘分别在LPS注射后9小时和18小时出现大量深浅不一的颗粒状细胞碎片. TUNEL阳性染色细胞随时间延长而增多.电镜下可见到凋亡的淋巴细胞.在18小时还见到细胞坏死现象. Bcl-2的表达随着LPS作用时间的延长而明显下降,与TUNEL染色的相关分析表明,Bcl-2的表达与细胞凋亡有显著的负相关. 结论在LPS所致的SIRS/MODS模型中,脾细胞损伤以凋亡为主,随LPS作用时间延长而加重,在晚期还会出现细胞坏死.Bcl-2参与了LPS引起的脾细胞凋亡效应. |
