小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞 上皮细胞培养 上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键。 体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜,因此培养在有胶原的底物上可能利于生长,另外人或小鼠表皮细胞培养在以3T3细胞为饲养层(用射线照射后)时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2+含量和温度,向培养基中加入表皮生长因子,均有利于表皮细胞生长。 小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞 上皮细胞培养以表皮细胞为例,用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞,其法如下(黑木凳志夫 1981) 1、取材:外科植皮或手术残余皮肤小块,早产流产儿皮肤更好,取角化层薄者,切成0.5-1平方厘米小块。 2、置0.02%EDTA中,室温,5分钟。 3、换入0.25%胰蛋白酶中,4℃过夜。 4、分离:取出皮块,用血管钳或镊子将表皮与层分开。 5、取出表皮,剪成更小的块后,置0.25%胰酶中,37℃,30—60分钟。 6、反复吹打,制成悬液。 7、培养:用80目不锈钢纱网滤过后,低速离心,吸去上清。 8、直接加入培养基(Eagle加20%小牛血清)制成细胞悬液,接种入培养瓶,CO2温箱培养。 小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞 上皮细胞培养 鼠结缔组织细胞胸苷激酶变异株L-M(TK-) 小鼠肥大细胞瘤细胞P815 小鼠骨髓瘤细胞P3X63Ag8 小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag14 小鼠成纤维细胞NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] 小鼠黑色素瘤细胞B16-F0 小鼠黑色素瘤细胞B16-F1 小鼠骨髓瘤细胞P3X63Ag8.653 小鼠骨髓细胞FDC-P1 小鼠成纤维细胞Φ2 小鼠骨髓瘤细胞Fox-NY C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-)LtK-11 小鼠骨髓瘤细胞SP2/0 小鼠骨髓瘤细胞P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠纤维肉瘤细胞WEHI-13VAR 小鼠皮下结缔组织细胞A9 小鼠黑色素瘤细胞B16 小鼠黑色素瘤细胞B16-F10 小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8101 小鼠乳腺癌细胞GR-M 小鼠乳腺癌细胞CCC-Ca761-03 小鼠胰岛内皮细胞MS1 小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞Beta-TC-6 小鼠乳腺肿瘤细胞C127 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1 小鼠胚胎成纤维细胞PA12 小鼠胚胎成纤维细胞MEF 小鼠原 B细胞株BaF3 小鼠胚胎成纤维细胞C3H 10T1/2 2A6 小鼠胚胎成纤维细胞BALB/C 3T3 小鼠子宫颈癌细胞U14 小鼠子宫颈癌细胞U14-GFP 正常小鼠睾丸 Sertoli细胞TM4 小鼠胚胎细胞SC-1 小鼠胚胎成纤维细胞(小鼠前体脂肪细胞)3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞Psi2 DAP 小鼠胚胎成纤维细胞BALB/3T3clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠畸胎瘤细胞F9 小鼠睾丸间质细胞瘤细胞MLTC-1 小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3 小鼠畸胎瘤细胞P19 小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)YAC-1 小鼠单核巨噬细胞J774A.1 小鼠T淋巴瘤细胞Cyc-Tag(S49) 小鼠血细胞WEHI-3 小鼠B淋巴细胞WEHI 231 小鼠淋巴细胞白血病L1210 小鼠T淋巴细胞Cl.Ly1+2-/9 小鼠淋巴瘤细胞P388D1(IL-1) 小鼠浆细胞瘤MPC-11 小鼠睾丸支持细胞(PyTL基因修饰)15P-1 小鼠T淋巴瘤细胞E.G7-OVA 小鼠巨噬细胞Ana-1 小鼠淋巴瘤细胞EL4 小鼠淋巴瘤细胞EL4.IL-2 小鼠白血病细胞L1210 小鼠淋巴瘤细胞L5178Y TK+/-clone(3.7.2C) 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW 264.7 小鼠淋巴瘤细胞P388D1 |