大鼠垂体瘤细胞GH3细胞 无菌操作注意事项 体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意，技术操作不规范,也会导致污染。因而．为在一切操作中为zui大可能的保证无菌．每一项工作都必须做到有条不紊和*靠。 大鼠垂体瘤细胞GH3细胞 无菌操作注意事项【培养前准备】 在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所（培养室、超净台）内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后．囚物品不全往返拿取而增加污染机会。 大鼠垂体瘤细胞GH3细胞 无菌操作注意事项【操作野消毒】 无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次（拖布要）．紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置．否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 【洗手和着装】 原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时，因整个前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，并于开始操作前要用75％酒精消毒手。如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需*洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。 【火焰消毒】 在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作，如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等，都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意：金属器械不能在为焰中烧的时间过长，以防退火，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜，再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时，火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞。 【操作】 进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶；用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用，以防扩大污染或导致细胞交叉污染。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽，以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方，瓶口zui易污染，加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸管丢掉。 大鼠垂体瘤细胞GH3 大鼠脑胶质瘤细胞C6 大鼠雪旺细胞RSC96 大鼠骨髓瘤细胞Y3-Ag1.2.3 大鼠纤维母细胞1/EJ 1-1 大鼠皮肤成纤维样细胞RS1 大鼠肌肉成纤维样细胞RM1 大鼠骨髓瘤细胞IR983F 大鼠成肌细胞L6 大鼠骨肉瘤细胞UMR-106 大鼠乳腺腺癌细胞MADB106 大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1 大鼠胰岛β细胞瘤细胞RIN-m5F 大鼠胰腺外分泌细胞AR42J 大鼠乳腺癌细胞SHZ-88 大鼠腹水癌细胞Walker/LLC-WRC 256 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞RBL-1 黄胸鼠肺成纤维细胞YCR 中国仓鼠肺细胞V79 中国仓鼠肺细胞CHL 黑化大家鼠肺成纤维细胞NRm 水貂肺上皮细胞MV-1-Lu 恒河猴肺细胞RM-L1 豚鼠肺细胞GP-F1 小耳猪肺细胞SEP-L1 小耳猪肺细胞SEP-L2 家猫肺细胞]FCA-L1 家猫肺细胞FCA-L2 大耳山羊肺细胞LDG-1 绵羊肺细胞OAR-L1 大额牛肺细胞BFR-L1 狗肺成纤维样细胞DogL1 赤狐肺成纤维样细胞RFL1 赤狐肺成纤维样细胞RF-88L 果子狸肺成纤维样细胞MPCL1 树鼩胎心成纤维样细胞TS-EH-1 猪髋动脉内皮细胞PIEC 树鼩胎心成纤维样细胞TS-EH-1 猪髋动脉内皮细胞PIEC 章鱼肝脏细胞L8824 草鱼肾细胞CY-2 牛肾细胞MDBK 非洲绿猴肾细胞VERO 叙利亚仓鼠肾细胞BHK-21 非洲绿猴肾细胞（SV40转化）COS-7 恒河猴肾细胞RM-1 恒河猴肾细胞MMK2 恒细胞河猴肾MMK3 家猫肾细胞CATK1 大耳山羊肾细胞LDG-2 大耳山羊肾细胞LDG-3 恒河猴肾细胞RM-2 恒河猴肾细胞RM-3 大额牛肾细胞BFR-K1 赤狐肾上皮样细胞RF-88K 花鼠肾上皮样细胞CHPK3 树鼩肾上皮样细胞TSHK3 山羊肾上皮样细胞DG-K1 猫星形脑胶质细胞PG-4（S+L-） 骨、关节、肌肉、皮肤系统 豚鼠皮肤细胞GP-S1 豚鼠皮肤细胞GP-S2 豚鼠皮肤细胞GP-S3 叙利亚仓鼠肌肉细胞GH-M1 叙利亚仓鼠皮肤细胞GH-S1 家猪皮肤细胞SSC-S1 小香猪皮肤细胞SSC-S2 家猫皮肤细胞FCA-S1 绵羊皮肤细胞OAR-S1 恒河猴皮肤细胞RM-S1 家兔皮肤细胞DR-S1 大额牛皮肤细胞BFR-S3 黄牛皮肤细胞BTA-S2 瘤牛皮肤细胞BIN-S1 牦牛皮肤细胞BMU-S1 赤狐皮肤成纤维样细胞RF-88S 豹猫肌肉成纤维样细胞LCM4 豹猫皮肤成纤维样细胞LCS5 豚鼠皮肤细胞GP-S1 豚鼠皮肤细胞GP-S2 豚鼠皮肤细胞GP-S3 |
