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传代细胞 免疫PCR技术

更新时间:2013-09-05      浏览次数:915

 传代细胞  免疫PCR技术

 
免疫PCR方法(Immuno-PCR)是Takeshi等1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术,具有抗原、抗体反应的特异性和PCR技术的性。它运用PCR的高度敏感性来放大抗原抗体反应的特异性,使实验中只需数百个抗原分子即可检测,甚至在理论上可检测到1至数个抗原分子。这种灵敏度使免疫检测技术达到了一个新的高度。
   免疫PCR主要由两个部分组成:
 
传代细胞  免疫PCR技术*部分是类似于普通酶联免疫吸附实验(ELISA)的抗原抗体反应;
 
传代细胞  免疫PCR技术第二部分即常规的PCR扩增和电泳检测。
 
其基本过程如下:首先将待检测的抗原吸附于固相,经封闭和冲洗后加入特异的抗体,此抗体常采用生物素标记。经孵育和冲洗后加入作为连接分子的亲和素或叶绿素,再孵育和冲洗加生物素标记的DNA,孵育和冲洗去除游离的DNA分子,然后加PCR扩增系统放大结合于固相的DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测放大的PCR产物。
  
近几年来,科技界陆续提出了免疫基因组学、肿瘤免疫组学、免疫组学、抗原组学、抗原表位组学等新概念。
 
这些概念的提出,表示继基因组、蛋白质组之后在科学上又一个新领域的产生;对生物技术来说,基因组研究的应用,通过抗原表位组学、抗体组学和抗原表位组学与抗体组学是建立在基因组学和蛋白组学基础上的新兴领域,正在成长为继基因组和蛋白组后的科学热点。应用相关的学科的成就,结合相关的技术,经过建立抗原表位库和抗体库,高通量筛选抗原靶标和抗原表位,可大大加速诊断、治疗药物靶标的筛选和研究与开发的进程。

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