抗原抗体的结合 体外抗原抗体反应又称血清学反应（serologicreaction），因抗体主要存在于血清中，试验时一般都采用血清标本，故名。但抗原抗体反应亦常用于细胞免疫测定，如对淋巴细胞表面分化抗原的鉴定。因此，血清学一词已被广义的抗原抗体反应所取代。 抗原与抗体在体外结合时，可因抗原的物理性状不同或参与反应的成分不同而出现各种反应，例如凝集、沉淀、补体结合及中和反应等。在此基础上进行改进，又衍生出许多快速而灵敏的抗原抗体反应，例如从凝集反应衍生出间接凝集、反向间接凝集、凝集抑制试验、协同凝集试验等；从沉淀反应结合电泳，衍生出免疫电泳、对流免疫电泳、火箭电泳等。此外，还有各种免疫标记技术，如免疫荧光、酶免疫测定、放射免疫、免疫电镜及发光免疫测定等。 抗原抗体结合具有高度特异性，即一种抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体结合而发生反应。抗原的特异性取决于抗原决定簇的数目、性质和空间构型，而抗体的特异性则取决于抗体IgFab段的可变区与相应抗原决定簇的结合能力。抗原与抗体不是通过共价键，而是通过很弱的短矩引力而结合，如范德华引力（Vanderwaal’sattractionforce）、静电引力（electrostaticforce）、氢键（hydrogenbond）及疏水性作用（hydrophobiceffect）等。 范德华引力与两种相互作用的分子或原子间的距离七次方成反比（F2＝1/d7），即两者越靠近，此引力越大。这种引力能否zui大限度地发挥作用，关键在于分子的空间构型。抗原与抗体分子的互补空间关系有助于该引力发挥作用，它可增加两种分子结合在一起的倾向，形成特异性抗原抗体复合物。若一个分子在形态上有一个凹陷，它能准确地与另一分子突出的基因互补，如同抗原―抗体、酶―底物系统的活性部位的相互作用，这种相互作用可产生zui强的VanderWaal接触。 静电引力又称库仑引力（Coulumbicattractionforce）发生在带有相反电荷的基团之间，例如NH3＋与COO－之间。这种结合力的强度与两个相互作用基团间的距离平方成反比（F2＝1/d2）。若两个分子间有可能发生电荷转移的部位，该部位也可能产生静电引力。 氢键可在共价键结合的氢原子间产生。氢原子可与一个带负电荷的原子共价结合，再与另一个带负电荷原子的非共价电子相互作用，就形成了氢键。 辣根过氧化物酶标记一抗 生物素标记一抗 胶体金标记一抗 罗丹明（RBITC）标记一抗 碱性磷酸酶（AP）标记一抗 FITC标记一抗 Cy3标记一抗 Cy5标记一抗 Cy5.5标记一抗 Cy7标记一抗 PE标记一抗 PE-Cy3标记一抗 PE-CY5标记一抗APC（蓝色）标记一抗 Alexa Fluor 350 蓝色荧光标记一抗 Alexa Fluor 488 绿色荧光标记一抗 Alexa Fluor 555 红色荧光标记一抗 Alexa Fluor 647 远红外荧光标记一抗 标记单抗 标记多抗 标记标签抗体 标记磷酸化抗体 标记内参抗体 标记甲基化抗体 标记乙酰化抗体 标记药物与化合物抗体 标记植物抗体 辣根过氧化物酶标记二抗 例如： －O…H－O－ －O…H－N－ －N…H－N－ 氢键较弱，键能的大小取决于方向，即氢键具有方向性。在抗原抗体反应中氨基或羧基是主要的供氢体，H＋必须直接对着或靠近带负电荷的受体原子，才能产生强的氢键能，若间接对着，键能则非常小。氢键比VanderWaal引力更特异，因为它需要分子上存在互补的供氢体和受体基团。 疏水性结合或疏水作用在各种抗原抗体相互反应中十分重要。抗原和抗体分子上的疏水决定簇在水中不形成氢键，因此倾向于彼此间相互吸引，而不与水发生作用，故称之为疏水性作用。疏水性作用虽不是引力，但它有助于抗原与抗体结合。例如含有苯基的抗原决定簇倾向于被其他非极性基团围绕，因此该抗原决定簇从水环境中移动进入抗体分子的Fab段的裂缝中，与抗体结合。这说明结合的高能量归因于苯基的疏水性作用。 上述这些引力当pH和离子强度在生理条件下，通常是zui大的。pH值低于3～4或高于10.5，这些引力非常弱，以致抗原抗体复合物易解离。 抗原与抗体结合有高度特异性，这种结合虽具有相当稳定性，但为可逆反应。因抗原与抗体两者为非共价键结合，犹如酶和底物的结合一样，两种分子间不形成稳定的共价键，因此在一定条件下可以解离。 |
