细胞库 细胞株查询 （一）制作准备
设备用具：切片机、恒温箱、溶蜡箱、玻璃缸、载玻片、盖玻片、手术刀片、镊子、包埋盒。
试 剂 ：10％福尔马林、酒精、二甲苯、固体石蜡、苏木精、酸水、氨水、酒精伊红染色剂型、加拿大树胶
（二）HE染色石蜡切片的制作过程
步骤一：取材与固定：
取动物新鲜组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏固定液)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
步骤一：脱水透明：
一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。
步骤三：浸蜡包埋：
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡*浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒)，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。
步骤四：切片与贴片：
将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。
步骤四：脱蜡
常用HE染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，zui后入蒸馏水，就可染色。
步骤五：染色
HE染色过程是：
小鼠胚胎成纤维细胞 3T3-Swiss albino细胞
人肺癌细胞 A549 [A-549]细胞
中国仓鼠卵巢细胞（二氢叶酸还原型缺陷型） CHO/dhFr-细胞
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆) CHO-K1细胞
小鼠T淋巴瘤细胞 Cyc-Tag(S49)细胞
人前列腺癌细胞 DU 145 [DU145；DU-145]
小鼠骨髓细胞 FDC-P1细胞
大鼠垂体瘤细胞 GH3细胞
小鼠垂体瘤细胞 GT1-1细胞
人胚肾细胞 293 [HEK-293；HEK293]细胞
人宫颈癌细胞 HeLa细胞
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 MC3T3-E1细胞
人乳腺癌细胞 MCF7 [MCF-7]细胞
人乳腺癌细胞 MDA-MB-231细胞
人乳腺癌细胞 MDA-MB-435S细胞
人乳腺癌细胞 MDA-MB-453细胞
小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质母细胞瘤细胞之融合细胞 NG108-15 [108CC15]细胞
小鼠胚胎成纤维细胞 NIH/3T3细胞
人恶性多发性畸胎瘤细胞 NTERA-2细胞
小鼠睾丸畸胎瘤细胞 P19细胞
人卵巢畸胎瘤细胞 PA-1细胞
小鼠胚胎成纤维细胞 PA12细胞
细胞库索引：www.shtpbio.com
人胰腺癌细胞 PANC-1细胞
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 PC-12 [PC12]细胞
人成骨肉瘤细胞 Saos-2细胞
人神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y细胞
人卵巢腺癌细胞 SK-OV-3 [SKOV3]细胞
人骨肉瘤细胞 U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]细胞
小鼠血细胞 WEHI-3 [WEHI3]
小鼠成纤维细胞 Φ2细胞
人横纹肌肉瘤细胞 A-204细胞
人肺腺癌细胞 Calu-3细胞
非洲绿猴肾细胞（SV40转化） COS-7 [COS7]细胞
人肾癌Wilms细胞 G401细胞
人肝癌细胞 Hep G2 [HepG2]细胞
人包皮成纤维细胞 HFF细胞
人早幼粒急性白血病细胞 HL-60细胞
人骨肉瘤细胞 HOS细胞
人慢性髓系白血病细胞 K562细胞
人前列腺癌细胞 LNCaP细胞
人乳腺癌细胞 MCF 7B细胞
小鼠红白血病细胞 MEL细胞
人急性淋巴母细胞性白血病细胞 MOLT-4细胞
人胚肺成纤维细胞 MRC-5细胞
人小细胞肺癌细胞 NCI-H209细胞
人Burkitt淋巴瘤细胞 Raji细胞
细胞库索引：www.shtpbio.com ①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。
②酸水及氨水中分色，各数秒钟。
③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。
④入70％和90％酒精中脱水各10分钟。
⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。
步骤六：脱水透明：
染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。
步骤七：封固
将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用。 |
