端粒酶的激活在维持HaCaT细胞永生化的意义

在正常的人体细胞中端粒长度限制了细胞分裂次数，端粒程序性地缩短限制了转化细胞的生长能力，这很可能是肿瘤形成的一个抑制机制。永生性 的获得是恶性肿瘤细胞的一个显著生物学特征，也是肿瘤组织具有无限增殖能力的基础，永生化细胞要永远分裂下去就必须维持和平衡端粒长度，由此推测永生化细胞中应该有端粒酶的活性表达，以维持其生长，而肿瘤细胞无限增殖能力的维持也应依赖于端粒酶的激活。1965年Hayflick首先描述了正常人成纤维细胞分裂次数是有限的，随后大多数体细胞都有所谓的分裂钟来限制它们的分裂次数。一般来说，正常情况下培养的体细胞分裂40~70式后衰老死亡，此即Hayflick限制或M1期。另外一些细胞由于癌基因、抑癌基因等的突变逃逸M1期，获得一定的额外增值能力，进入第二死亡期（M2）。此时端粒酶仍为阴性，端粒进一步缩短。大部分细胞达到极限而死亡，生存下来的细胞具有无限增殖的能力，端粒酶重新活化，成为永生细胞。从上述可知，M1/M2假说认为细胞获得永生化必须克服两个危机期，M1期和M2期。在M1期，细胞端粒开始缩短，到达临界水平时发生DNA损伤反应，通过抑癌蛋白P53，pRb等阻止细胞分裂，细胞开始衰老死亡。癌基因SV40T，HPV16E6和E7，抑癌基因p53和pRb突变均能使细胞逃逸M1期，并获得额外增殖能力。此时端粒酶仍为阴性，端粒极度缩短，zui终到达M2期，此时端粒酶仍为阴性，端粒进一步缩短。大部分细胞达到极限而死亡，极少数细胞由于激活了端粒酶，端粒结构和功能得以恢复，基因组保持稳定，使细胞永生化。另一方面，永生化的细胞的无限增殖可能给另外的基因损伤的积累提供机会，导致进行性肿瘤性发展。因此，在肿瘤形成过程中，端粒的延长是一个重要的甚至是一个必要的步骤。1994年KIM利用其建立的具有高灵敏度的TRAP法先后对来自18种不同人体组织的100个永生细胞株、代表人类12种不同肿瘤组织的101个针吸活检标本22个正常细胞株和50个癌旁组织标本进行了端粒酶活性的检测，结果发现有98%的永生细胞株，90%的肿瘤活检标本端粒酶阳性，而在正常细胞株和癌旁组织标本中端粒酶全部为阴性，从而更加有力的佐证了端粒酶的激活在维持细胞永生化、促进恶性肿瘤的发生发展方面具有重要的意义。目前人们已在代表不用肿瘤类型的大约1000多个活检样品中发现大约85%的样品呈端粒酶阳性反应。相反，90%以上的邻近正常组织却是端粒酶阴性，从而将这个酶与永生化和肿瘤的形成密切在一起。因而端粒酶的重新表达在细胞永生化及癌变过程中起着重要的作用。

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细胞库细胞索引（部分）
人胚肺成纤维细胞，MRC-5 
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人肺细胞，HLF-a 
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人胚肺细胞 VA13细胞，WI-38 VA13亚系 2RA 
人胚肺二倍体细胞，HEL-1 
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人肺腺癌细胞，Calu-3 
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人非小细胞肺腺癌细胞，NCI-H2087 
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人肺腺鳞癌细胞，NCI-H596 
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H838 
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人肺鳞癌瘤株，LTEP-s 
人肺鳞癌细胞，NCI-H1703
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人高转移肺癌细胞，95-D 
人肺鳞癌细胞，SK-MES-1 
人大细胞肺癌细胞，NCI-H661 
人肺黏液上皮样癌细胞，NCI-H292 
人肺退行性癌细胞，Calu-6 
人肺腺癌细胞，NCI-H1395 
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H358 
人非小细胞肺癌细胞，HCC827 
人典型小细胞肺癌细胞，NCI-H1688 
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H1299 
11965-092 高糖DMEM，液体
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有人甚至认为表达端粒酶的正常细胞更易癌变。端粒酶活性与肿瘤的这种特殊关系使之在诊断与治疗方面具有重要的应用价值。对端粒酶活性的一直可能对某些类型的肿瘤来说是一个很有意义的治疗方法。