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人包皮成纤维细胞 HFF细胞 细胞传代培养(消化法)
具体操作:
一. 传代前准备:
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,人包皮成纤维细胞 HFF细胞 用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
细胞库常用细胞:
人包皮成纤维细胞HFF
人羊膜细胞WISH
人羊膜细胞HA
人胚胎干细胞E1C4
人羊膜细胞HAN
人宫颈癌细胞HeLa
人卵巢畸胎瘤细胞PA-1
人卵巢腺癌细胞SK-OV-3
人宫颈癌细胞Ca Ski
人子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B
人胎盘绒膜癌细胞BeWo
人宫颈癌细胞C-33A
人胚胎干细胞E1C2
人宫颈癌细胞Hela P10s-11F
人宫颈癌细胞Hela S3
人子宫颈癌细胞(GFP基因修饰)HeLa-GFP
人卵巢癌细胞Caov-3
人宫颈癌细胞H1HeLa
二.胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),人包皮成纤维细胞 HFF细胞 加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,*消化温度是37℃。
2. 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
人卵巢癌细胞A2780
人宫颈癌细胞Hela 229
人卵巢癌细胞HO-8910
人子宫鳞癌细胞(高分化)HCC-94
人卵巢透明细胞癌细胞ES-2
人子宫颈鳞状细胞癌细胞SiHa
人胚胎干细胞Endeavour-1
人子宫内膜腺癌细胞HEC-1-A
人胎盘绒毛癌细胞JAR
人卵巢癌细胞COC1
人子宫内膜腺癌细胞RL95-2
人卵巢腺癌细胞OVCAR-3
人胚胎干细胞HES 3.3
三.吹打分散细胞:
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
人胚胎干细胞SH.hEXl(46.xx)
人胚胎干细胞HES 3.2
人胚胎干细胞HES 3.1
人胚胎干细胞E1C1
人胚胎眼巩膜成纤维细胞HFSF
人胚胎眼 Tenon's囊成纤维细胞HFTF
人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1
人鼻咽癌细胞CNE
人舌鳞癌细胞CAL-27
人喉癌上皮细胞Hep-2
人舌鳞癌细胞Tca-8113
四.分装稀释细胞:
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。zui后要做好标记。
人咽鳞癌细胞FaDu
人舌鳞癌细胞Tca8113-P60
人口腔表皮样癌细胞KB
人鼻咽癌细胞CNE-2Z
KM9304 EBV-转化人淋巴细胞(彝族)
人淋巴细胞1301
人类粒细胞系Human Cell line 1D3
人永生化淋巴细胞CNLMG-B5537LC
人类成纤维细胞CNLMG-B5537SKIN
人 EB病毒转化的 B细胞CGM1
人类淋巴母细胞瘤细胞HLCL 14C1
人早幼粒急性白血病细胞HL-60
人慢性髓系白血病细胞K562
人急性淋巴母细胞性白血病细胞MOLT-4
人 Burkitt淋巴瘤细胞Raji
人B淋巴细胞瘤细胞Ramos
人急性单核细胞白血病细胞THP-1
人组织细胞淋巴瘤细胞U937
人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat, Clone E6-1
人巨核细胞白血病细胞株M-07e
人红系白血病细胞TF-1
人原巨核细胞型白血病细胞UT-7
人 Burkkit淋巴瘤细胞Daudi
人T淋巴瘤细胞(Tet-on基因修饰)Jurkat D,E
人T淋巴瘤细胞 Jurkat亚系Jurkat77
人急性T淋巴细胞白血病细胞TALL-104
人T淋巴细胞白血病细胞HuT 78
人急性T淋巴细胞性白血病细胞I 2.1
人伯基特淋巴瘤细胞EB-3
人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat
人急性T淋巴细胞白血病细胞JurkatE6-1
IL-2依赖的人淋巴 T细胞系Kit225
人T细胞白血病细胞C8166
人急性骨髓白血病细胞KG-1a
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Capan-1胰腺癌细胞(Capan-1细胞株) ST细胞(ST传代细胞库) SP2/o细胞(SP2/o小鼠骨髓瘤细胞) Y-1 GFP细胞 Y-1 GFP肾上腺皮质细胞 SNU449细胞(SNU449肝癌细胞库)服务与支持
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