人包皮成纤维细胞 HFF细胞 细胞传代培养(消化法) 具体操作: 一. 传代前准备: 1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 3.正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。 4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。 5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。 6.取出预热好的培养用液:取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。 7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,人包皮成纤维细胞 HFF细胞 用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。 8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。 细胞库常用细胞: 人包皮成纤维细胞HFF 人羊膜细胞WISH 人羊膜细胞HA 人胚胎干细胞E1C4 人羊膜细胞HAN 人宫颈癌细胞HeLa 人卵巢畸胎瘤细胞PA-1 人卵巢腺癌细胞SK-OV-3 人宫颈癌细胞Ca Ski 人子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B 人胎盘绒膜癌细胞BeWo 人宫颈癌细胞C-33A 人胚胎干细胞E1C2 人宫颈癌细胞Hela P10s-11F 人宫颈癌细胞Hela S3 人子宫颈癌细胞(GFP基因修饰)HeLa-GFP 人卵巢癌细胞Caov-3 人宫颈癌细胞H1HeLa 二.胰蛋白酶消化; 1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),人包皮成纤维细胞 HFF细胞 加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,*消化温度是37℃。 2. 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。 3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。 人卵巢癌细胞A2780 人宫颈癌细胞Hela 229 人卵巢癌细胞HO-8910 人子宫鳞癌细胞(高分化)HCC-94 人卵巢透明细胞癌细胞ES-2 人子宫颈鳞状细胞癌细胞SiHa 人胚胎干细胞Endeavour-1 人子宫内膜腺癌细胞HEC-1-A 人胎盘绒毛癌细胞JAR 人卵巢癌细胞COC1 人子宫内膜腺癌细胞RL95-2 人卵巢腺癌细胞OVCAR-3 人胚胎干细胞HES 3.3 三.吹打分散细胞: 1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。 3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。 4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。 人胚胎干细胞SH.hEXl(46.xx) 人胚胎干细胞HES 3.2 人胚胎干细胞HES 3.1 人胚胎干细胞E1C1 人胚胎眼巩膜成纤维细胞HFSF 人胚胎眼 Tenon's囊成纤维细胞HFTF 人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1 人鼻咽癌细胞CNE 人舌鳞癌细胞CAL-27 人喉癌上皮细胞Hep-2 人舌鳞癌细胞Tca-8113 四.分装稀释细胞: 1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。 2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。zui后要做好标记。 人咽鳞癌细胞FaDu 人舌鳞癌细胞Tca8113-P60 人口腔表皮样癌细胞KB 人鼻咽癌细胞CNE-2Z KM9304 EBV-转化人淋巴细胞(彝族) 人淋巴细胞1301 人类粒细胞系Human Cell line 1D3 人永生化淋巴细胞CNLMG-B5537LC 人类成纤维细胞CNLMG-B5537SKIN 人 EB病毒转化的 B细胞CGM1 人类淋巴母细胞瘤细胞HLCL 14C1 人早幼粒急性白血病细胞HL-60 人慢性髓系白血病细胞K562 人急性淋巴母细胞性白血病细胞MOLT-4 人 Burkitt淋巴瘤细胞Raji 人B淋巴细胞瘤细胞Ramos 人急性单核细胞白血病细胞THP-1 人组织细胞淋巴瘤细胞U937 人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat, Clone E6-1 人巨核细胞白血病细胞株M-07e 人红系白血病细胞TF-1 人原巨核细胞型白血病细胞UT-7 人 Burkkit淋巴瘤细胞Daudi 人T淋巴瘤细胞(Tet-on基因修饰)Jurkat D,E 人T淋巴瘤细胞 Jurkat亚系Jurkat77 人急性T淋巴细胞白血病细胞TALL-104 人T淋巴细胞白血病细胞HuT 78 人急性T淋巴细胞性白血病细胞I 2.1 人伯基特淋巴瘤细胞EB-3 人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat 人急性T淋巴细胞白血病细胞JurkatE6-1 IL-2依赖的人淋巴 T细胞系Kit225 人T细胞白血病细胞C8166 人急性骨髓白血病细胞KG-1a |