ES-2细胞 人卵巢透明细胞癌

ES-2细胞 人卵巢透明细胞癌   微载体培养原理与操作

1.原理：其原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养容器的培养液中，作为载体，使细
胞在微载体表面附着生长，同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。
贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖，要经历黏附贴壁、生长和扩展成单层三个阶段。
细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖，故细胞在微载体表面的贴附是进一步铺展和生长的
关键。黏附主要是靠静电引力和范德华力。细胞能否在微载体表面黏附，主要取决于细胞与
微载体的接触概率和相融性。
2. 搅拌转速：由于动物细胞无细胞壁，对剪切力敏感，ES-2细胞 人卵巢透明细胞癌  因而无法靠提高搅拌转速来增加接触
概率。通常的操作方式是：在贴壁期采用低搅拌转速，时搅时停；数小时后，待细胞附着于
微载体表面时，维持设定的低转速，进入培养阶段。微载体培养的搅拌非常慢，zui大速度
75r/min。
3.细胞与微载体的相融性，ES-2细胞 人卵巢透明细胞癌 是与微载体表面理化性质有关。一般细胞在进入生理PH值时，表
面带负电荷。若微载体带正电荷，则利用静电引力可加快细胞贴壁速度。若微载体带负电荷，
因静电斥力使细胞难于黏附贴壁，但培养液中溶有或微载体表面吸附着二价阳离子作为媒介
时，则带负电荷的细胞也能贴附。

细胞株查询：
ACHN    人肾癌细胞系(ACHN)
AGS    人胃腺癌细胞
AN3 CA    人子宫内膜腺癌细胞（AN3 CA）
Ana-1    小鼠巨噬细胞
Anglne    人卵巢癌细胞系(Anglne)
AR42J    胰腺细胞AR42J
AsPC-1    人转移胰腺腺癌细胞
B82    鼠细胞系（B82）
B95-8    绒猴EBV转化的白细胞
BALB/3T3 clone A31    小鼠胚胎成纤维细胞
Bcap-37    人乳腺癌细胞Bcap-37
Bel-7402    人肝癌细胞系(Bel-7402)
BEL-7404    人肝癌细胞
BEL-7405    人肝癌细胞
Bewo    人绒毛膜肿瘤细胞系(Bewo)
BGC-823    人胃腺癌细胞（低分化）
BHK-21    叙利亚仓鼠肾细胞系（BHK-21）
BI U－87    膀胱癌细胞（BI U－87）
BRL    大鼠肝细胞
BSC-1    猴肾细胞系(BSC-1)
BSG823    人胃癌BSG823
BT-474 [BT474]    人乳腺导管癌细胞
BT-549    人乳腺管癌细胞
BxPC-3    人原位胰腺腺癌细胞
C127    小鼠乳腺肿瘤细胞
C2C12    小鼠成肌细胞C2C12
C-33A    人子宫癌细胞C-33A
C3H/10T1/2, Clone 8    小鼠胚胎成纤维细胞
C6    大鼠胶质瘤细胞
C6/36    蚊子细胞（C6/36）
C8-D1A    鼠小脑细胞C8-D1A
Ca Ski    人宫颈癌肠转移细胞
CA46    Burkitts淋巴瘤细胞系（CA46)
Caco-2    人结肠腺癌细胞
CaES-17    人食管癌细胞CaES-17
Caki-1    人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
Calu-3    人肺腺癌 (胸水)
Calu-6    人退行性癌细胞
Caov－3    人乳突状卵巢腺癌细胞（Caov－3）
Caski    人宫颈上皮细胞癌（Caski）
CBRH-7919    大鼠肝癌细胞
CCD-1095Sk    人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞
CCRF-CEM [CCRF CEM]    人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞
CFPAC-1    人胰腺癌细胞
CGM1    人EB病毒转化的B细胞
Chang liver    人张氏肝细胞
CHL    仓鼠肺细胞
CHMAS    人肥大细胞白血病细胞CHMAS
CHO/dhFr-    仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷
CHO-K1    仓鼠卵巢细胞亚株
CHSE    鲑鱼胚胎细胞CHSE
CIK    草鱼肾脏细胞(CIK)
CNE    人鼻咽癌细胞CNE（低分化）
CNE2    鼻咽癌细胞CNE2
CoC1    人卵巢癌细胞系(CoC1)
CoC1/DDP    CoC1细胞耐药亚株(CoC1/DDP)
COLO 205    人结肠癌细胞
COLO-320    人结肠腺癌细胞
COS-1    非洲绿猴SV40转化的肾细胞
COS-7    非洲绿猴SV40转化的肾细胞
CRFK    猫肾细胞
CTLA4 Ig-24    中国仓鼠卵巢细胞
CV-1 [Part of the Wistar Special Collection]    非洲绿猴肾细胞
CW-2    人结肠腺癌细胞
Dami    人巨核细胞白血病细胞
Daudi    人成巨核细胞白血病细胞
DLD-1    人结直肠腺癌上皮细胞
DMS153    人小细胞肺癌DMS153
DT40    鸡淋巴瘤细胞
DU 145    人前列腺癌细胞
EAC-E2G8    鼠腹水瘤（EAC-E2G8）
EBTr (NBL-4)    牛胚气管细胞
Eca-109    人食道癌细胞Eca-109
ECV-304    人脐静脉内皮细胞系(ECV-304)(具有T24细胞特性)
EL-4    小鼠淋巴瘤（EL-4）
EPC    鲤鱼上皮细胞EPC
ES-2    人卵巢透明细胞癌
F56    人腺癌细胞系(F56)
F81    猫肾细胞
FaDu    人咽鳞癌细胞
FG    牙鲆细胞FG

此种培养方式中，细胞贴附于固定的表面生长，不因为搅拌而跟随培养液一起流动，因此比较容易更换培养液，不需要特殊的分离细胞和培养液的设备，可以采用灌流培养获得高细胞密度，能有效地获得一种产品；但扩大规模较难，不能直接监控细胞的生长情况，故多用于制备用量较小、价值高的生物药品。

CelliGen、CelliGen PlusTM和Bioflo3000反应器是常用的贴壁培养式生物反应器，用于细胞的贴壁培养时可使用篮式搅拌系统和圆盘状载体。此载体是直径6毫米的无纺聚酯纤维圆片，具有很高的表面积与体积比（1200cm2/g），有利于获得高细胞密度。篮式搅拌系统和载体培养是目前贴壁细胞培养使用zui多的方式，除用于293细胞的培养外，还用于杂交瘤细胞培养、Hela细胞培养、CHO细胞培养及其它细胞培养。此种方式培养293细胞，细胞接种后贴壁快，接种1小时后细胞贴壁率可达98%以上，采用灌流培养。整个培养周期约7-10天，细胞增殖25-50倍。

微载体培养

微载体是目前*的zui有发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点，放大容易。目前微载体培养广泛用于培养各种类型细胞，生产蛋白质产品，如293细胞、成肌细胞、Vero细胞、CHO细胞。常用商品化微载体有三种：Cytodex?，Cytopore和Cytoline。

使用较多的反应器有两种：贝朗公司的BIOSTAT?B反应器，使用双桨叶无气泡通气搅拌系统；NBS公司的CelliGen、CelliGen PlusTM和Bioflo3000反应器，使用Cell-lift双筛网搅拌系统。两种系统都能实现培养细胞和收获产物的有效分离。

微载体培养293细胞，首先要选择合适的微载体类型和搅拌速度。接种细胞可用1L spinner微载体培养系统或是其它贴壁培养方式准备，采用灌流培养，培养周期10-15天，能达到的细胞密度为5-10×106/ml。