细胞消化法 传代培养 具体操作: 一. 传代前准备: 1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 3.正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,细胞消化法 传代培养 不仅便于操作而且可减少污染。 4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。 5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。 6.取出预热好的培养用液:取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。 7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。 8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。 二.胰蛋白酶消化; 1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,*消化温度是37℃。 2. 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。 3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。 细胞株查询: ACHN 人肾癌细胞系(ACHN) AGS 人胃腺癌细胞 AN3 CA 人子宫内膜腺癌细胞(AN3 CA) Ana-1 小鼠巨噬细胞 Anglne 人卵巢癌细胞系(Anglne) AR42J 胰腺细胞AR42J AsPC-1 人转移胰腺腺癌细胞 B82 鼠细胞系(B82) B95-8 绒猴EBV转化的白细胞 BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞 Bcap-37 人乳腺癌细胞Bcap-37 Bel-7402 人肝癌细胞系(Bel-7402) BEL-7404 人肝癌细胞 BEL-7405 人肝癌细胞 Bewo 人绒毛膜肿瘤细胞系(Bewo) BGC-823 人胃腺癌细胞(低分化) BHK-21 叙利亚仓鼠肾细胞系(BHK-21) BI U-87 膀胱癌细胞(BI U-87) BRL 大鼠肝细胞 BSC-1 猴肾细胞系(BSC-1) BSG823 人胃癌BSG823 BT-474 [BT474] 人乳腺导管癌细胞 BT-549 人乳腺管癌细胞 BxPC-3 人原位胰腺腺癌细胞 C127 小鼠乳腺肿瘤细胞 C2C12 小鼠成肌细胞C2C12 C-33A 人子宫癌细胞C-33A C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠胚胎成纤维细胞 C6 大鼠胶质瘤细胞 C6/36 蚊子细胞(C6/36) C8-D1A 鼠小脑细胞C8-D1A Ca Ski 人宫颈癌肠转移细胞 CA46 Burkitts淋巴瘤细胞系(CA46) Caco-2 人结肠腺癌细胞 CaES-17 人食管癌细胞CaES-17 Caki-1 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 Calu-3 人肺腺癌 (胸水) Calu-6 人退行性癌细胞 Caov-3 人乳突状卵巢腺癌细胞(Caov-3) Caski 人宫颈上皮细胞癌(Caski) CBRH-7919 大鼠肝癌细胞 CCD-1095Sk 人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞 CCRF-CEM [CCRF CEM] 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 CFPAC-1 人胰腺癌细胞 CGM1 人EB病毒转化的B细胞 Chang liver 人张氏肝细胞 CHL 仓鼠肺细胞 CHMAS 人肥大细胞白血病细胞CHMAS CHO/dhFr- 仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO-K1 仓鼠卵巢细胞亚株 CHSE 鲑鱼胚胎细胞CHSE CIK 草鱼肾脏细胞(CIK) CNE 人鼻咽癌细胞CNE(低分化) CNE2 鼻咽癌细胞CNE2 CoC1 人卵巢癌细胞系(CoC1) CoC1/DDP CoC1细胞耐药亚株(CoC1/DDP) COLO 205 人结肠癌细胞 COLO-320 人结肠腺癌细胞 COS-1 非洲绿猴SV40转化的肾细胞 COS-7 非洲绿猴SV40转化的肾细胞 CRFK 猫肾细胞 CTLA4 Ig-24 中国仓鼠卵巢细胞 CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] 非洲绿猴肾细胞 CW-2 人结肠腺癌细胞 Dami 人巨核细胞白血病细胞 Daudi 人成巨核细胞白血病细胞 DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞 DMS153 人小细胞肺癌DMS153 DT40 鸡淋巴瘤细胞 DU 145 人前列腺癌细胞 EAC-E2G8 鼠腹水瘤(EAC-E2G8) EBTr (NBL-4) 牛胚气管细胞 Eca-109 人食道癌细胞Eca-109 ECV-304 人脐静脉内皮细胞系(ECV-304)(具有T24细胞特性) EL-4 小鼠淋巴瘤(EL-4) EPC 鲤鱼上皮细胞EPC ES-2 人卵巢透明细胞癌 F56 人腺癌细胞系(F56) F81 猫肾细胞 FaDu 人咽鳞癌细胞 FG 牙鲆细胞FG 菌种 : 粘质沙雷氏菌 Serratia marcescens 粘质赛氏杆菌 Serratia marcescens 粘质沙雷菌 Serratia marcescens 粘质沙雷氏菌 Serratia marcescens 无花果沙雷氏菌 Serratia ficaria 深海丝氨酸球菌 Serinicoccus profundi 反刍月形单胞菌反刍亚种 牛月形单胞菌 Selenomonas bovis 鲑色沉积物杆状菌 Sediminibacterium salmoneum 嗜盐沉积物杆菌 Sediminibacillus halophilus 白色沉积物杆菌 Sediminibacillus albus 罕见斯卡多维氏菌 Scardovia inopinatum 苏氏血杆菌 Sanguibacter suarezii 土壤血杆菌 Sanguibacter soli 海血杆菌 Sanguibacter marinus 科氏血杆菌 Sanguibacter keddieii 菊粉血杆菌 考氏栖盐水芽孢杆菌 Salsuginibacillus kocurii 嗜盐栖盐水芽孢杆菌 Salsuginibacillus halophilus 肠沙门氏菌肠亚种 Salmonella enterica subsp. enterica 肋生盐弧菌肋生亚种 Salinivibrio costicola subsp. costicola 热带盐水孢菌 Salinispora tropica 栖沙盐水孢菌 Salinispora arenicola 土壤盐坑微菌 玫瑰色盐水球菌 Salinicoccus roseus 青岛盐水球菌 Salinicoccus qingdaoensis 昆明盐水球菌 Salinicoccus kunmingensis 西班牙盐水球菌 Salinicoccus hispanicus 耐盐盐水球菌 Salinicoccus halodurans 嗜碱盐水球菌 Salinicoccus alkaliphilus 新疆盐地杆菌 Salinibacterium xinjiangense 阿穆尔斯克湾盐地杆菌 Salinibacterium amurskyense 康氏盐渍芽孢杆菌 Salinibacillus kushnerii 艾丁湖盐渍芽孢杆菌 嗜盐盐渍微菌 Salimicrobium halophilus 白色盐渍微菌 Salimicrobium album 需盐需盐杆菌 Salegentibacter salegens 米氏需盐杆菌 Salegentibacter mishustinae 海参需盐杆菌 Salegentibacter holothuriorum 成链需盐杆菌 Salegentibacter catena 新疆糖丝菌 Saccharothrix xinjiangensis 德克萨斯糖丝菌 Saccharothrix texasensis 丁香糖丝菌 Saccharothrix syringae 易变糖丝菌易变亚种 Saccharothrix mutabilis subsp. mutabilis 易变糖丝菌野山羊亚种 Saccharothrix mutabilis subsp. capreolus 长孢糖丝菌 Saccharothrix longispora 西班牙糖丝菌 Saccharothrix espanaensis 淡蓝褐糖丝菌 Saccharothrix coeruleofusca 澳大利亚糖丝菌 Saccharothrix australiensis 塔氏糖多孢菌 Saccharopolyspora taberi 针脊孢糖多孢菌 Saccharopolyspora spinosporotrichia 刺糖多孢菌 Saccharopolyspora spinosa 山东糖多孢菌 Saccharopolyspora shandongensis 直杆糖多孢菌 Saccharopolyspora rectivirgula 江西糖多孢菌 |