人非小细胞肺癌细胞H125细胞 一、放射自显影 1.把干燥的凝胶或印迹紧密贴放在X-射线胶片乳胶层上。Kodak XAR或Fuji RX胶片比较合适。带有14C或35S标记的印迹或样品必须按正确的方向把正面贴在胶片上以保证充分曝光。 2.在室温下置于一个密封蔽光的容器中适当时间。 3.根据制造商推荐的方法操作。 二、PPO荧光显影 PPO-浸润凝胶 1.电泳后或染色后,把凝胶放入脱色剂(7%冰醋酸,25%甲醇)振荡30分钟。小心倒掉脱色剂、DMSO废液并去掉多余水分。加入5倍凝胶体积的DMSO废液。 2.试问下振荡45分钟,去掉DMSO废液,再加入5倍凝胶体积的新鲜DMSO。 3。室温下振荡45分钟,把DMSO导入DMSO废液贮存器,在DMSO中加入5倍凝胶体积的22%PPO。 4.试问下振荡45分钟,把PPO/DMSO倒回贮液器,作为日常工作,这个溶液可再次使用(一个带有35S的甲硫氨酸的500ml原液可供使用。 5.那PPO浸润的凝胶放在缓缓流动的水中,当PPO扩散出来是,凝胶立即变白。 6.用新鲜的水流轻轻冲洗30分钟到一个小时,取出凝胶并按常法干燥。 7.把凝胶或印迹紧密贴在X射线胶片乳化层上。 8.置于一个-70摄氏度的密封蔽光的容器中适当时间。 9.根据仪器制造商上海通派生物科技有限公司推荐的方法操作。 注意事项 如果凝胶上蛋白质使用的是3H放射标记同位素,胶片应预先曝光以便在放射性衰变与胶片变黑程度间保持一个线性关系。 有一些公司供应商品话的PPO替代物 它们使用方便,但比PPO要贵许多。 用增感屏 1.把一张X-射线胶片放在乌酸钙增感屏上。然后把凝胶或印迹正确贴放在胶片乳胶层上。 2.置于一个-70摄氏度的密封、蔽光的容器里适当时间。 3.按供应商的说明操作。 人胚肺成纤维细胞MRC-5 人胚肺成纤维细胞CCC-HPF-1 人胚胎气管组织来源细胞CCC-HBE-2 人胚胎肺成纤维细胞WI-38 SV-40Z转化肺成纤维细胞WI38/VA13 人胚肺二倍体细胞2BS 人胚肺二倍体细胞KMB-17 人肺细胞HLF-a 人小细胞肺癌细胞DMS 153 人胚肺细胞 VA13细胞WI-38 VA13亚系 2RA 人胚肺二倍体细胞HEL-1 人胚肺细胞系KuMA 人肺转化细胞系AE1201 人肺鳞癌细胞NCI-H226 人胚肺二倍体细胞HEL-2 人支气管上皮样细胞BEAS-2B 人胚肺转化细胞SL-1 人肺腺癌细胞Calu-3 人小细胞肺癌细胞NCI-H209 人低分化肺腺癌细胞GLC-82 人小细胞肺癌细胞NCI-H446 人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H157 人肺鳞癌细胞NCI-H520 人肺巨细胞癌高转移细胞株PG-BE1 人肺巨细胞癌低转移细胞株PG-LH7 人肺癌细胞A-427 人低分化肺腺癌细胞SK-LU-1 人肺支气管癌细胞NCI-H1650 人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H1975 人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087 人小细胞肺癌细胞NCI-H2227 人非小细胞肺癌细胞NCI-H23 人肺腺鳞癌细胞NCI-H596 人非小细胞肺癌细胞NCI-H838 人肺鳞癌细胞LTEP-s 人小细胞肺癌细胞LTEP-sm 人肺鳞癌瘤株LTEP-s 人肺鳞癌细胞NCI-H1703 人肺鳞癌细胞NCI-H2170 人非小细胞肺癌细胞NCI-H524 人肺腺癌细胞SPC-A1 人肺癌细胞A549 人非小细胞肺癌细胞H125 人肺癌细胞H1299 人肺癌细胞TKB-1 人肺腺癌细胞LTEP-a-2 |