肝细胞培养 NCTC1469细胞小鼠正常肝细胞 初代组织块培养: 取新鲜肝脏,先剥除被膜和血管等纤维成分,用刀或剪刀把肝脏剪成1mm3左右的小块,采用帖壁培养法。 初代消化法培养: 把肝组织切成2~4立方毫米的小块,用不含钙镁的BSS液洗两次。移入1:1的0.1%胰蛋白酶和0.1%胶原酶(都用无钙镁BSS配置)中,4℃冷消化10~12小时后,通过250微米和64微米尼龙网或不锈钢纱网滤过。 收集细胞、BSS液洗1~2次、计数、接种培养。肝细胞培养 NCTC1469细胞小鼠正常肝细胞 消化培养肝细胞的另一种方法是灌流法;肝脏灌流需用全肝,以较小动物如小鼠和大鼠为好。 无菌解剖动物,取出肝脏,先用BSS洗除血污。取5ml注射器一支,吸取消化液后,把注射器头轻轻插入肝管中,用线绳结扎牢固,以防消化液漏出,轻轻把消化液注入肝管系统,并不时轻揉压肝脏,以便消化液进入肝小叶中; 消化液在肝内停留20~30分后,在吸出消化液的同时并轻揉压肝脏,以使肝细胞脱落和消化液吸出。 待吸净消化液后,注入离心管中,低速离心分离,用RPMI1640培养基培养(较其它培养基为好),能获得较纯的肝上皮细胞和获较好的效果。 传代培养: 待细胞生长连接成片后,用BSS洗一二次,肝细胞培养 NCTC1469细胞小鼠正常肝细胞 加1:1的0.025%胰蛋白酶和0.02%EDTA混合消化3~5分钟,待细胞回缩,便停止消化,弃掉消化液,用BSS洗一二次,注入营养液,吹打,制成细胞悬液,再接种培养。 KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤细胞 LS 180 (CL-187) [LS180] 人结肠腺癌细胞 LTEP-s 人肺鳞癌细胞 LTEP-sm 人小细胞肺癌细胞 M5076 小鼠卵巢网织细胞肉瘤细胞 MDBK 牛肾细胞 NCI-H205 人肾上腺腺瘤细胞 NCTC 1469 [NCTC1469] 小鼠正常肝细胞 Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠神经母细胞瘤细胞 OS-RC-2 人肾癌细胞 RD 人恶性胚胎横纹肌肉瘤细胞 SiHa 人子宫颈鳞状细胞癌细胞 T24 人膀胱移行细胞癌细胞 Tca-8113 [Tca8113] 人舌鳞癌细胞 TM3 正常小鼠睾丸Leydig细胞 TM4 正常小鼠睾丸Sertoli细胞 ΦA 人胚肾细胞(293来源病毒包装细胞) ΦA-GP 人胚肾细胞(293来源病毒包装细胞) Ca759 小鼠乳腺癌瘤株 Ca761 小鼠乳腺癌瘤株 Ca763 小鼠乳腺癌瘤株 L7712 小鼠T细胞性白血病瘤株 L7912 小鼠T细胞性白血病瘤株 HP615 小鼠肺癌瘤株 ZM755 小鼠滑膜肉瘤瘤株 P615 小鼠乳头状肺腺癌瘤株 H22 小鼠肝癌瘤株 Fc 小鼠前胃癌瘤株 U14 小鼠子宫颈癌瘤株 U27 小鼠子宫颈癌瘤株 LⅡ 小鼠网织细胞肉瘤瘤株 G422 小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株 L615 小鼠网织细胞性白血病瘤株 W256 Walker癌肉瘤256瘤株 Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株 LA795 小鼠肺腺癌瘤株 S-180 [S180] 小鼠肉瘤瘤株 VX2 兔间变表皮鳞癌瘤株 ME (Me) 小鼠黑色素瘤瘤株 DCS 小鼠树突状细胞肉瘤瘤株 B22 小鼠未分化神经胶质瘤瘤株 B16 小鼠黑色素瘤瘤株 LLT 小鼠Lewis肺癌瘤株 BNL.1ME A.7R.1 小鼠肝瘤株 A-375 [A375] 人恶性黑色素瘤瘤株 MCF7 [MCF-7] 人乳腺癌瘤株 Calu-3 人肺腺癌瘤株 LTEP-s 人肺鳞癌瘤株 HCT 116 [HCT116] 人结直肠腺癌瘤株 HeLa 人宫颈癌瘤株 769-P 人肾癌细胞 ACHN 人肾上腺癌细胞 BT-20 人乳腺癌细胞 BT-549 [BT549] 人乳腺导管癌细胞 Caki-2 人肾透明细胞癌细胞 CAL-27 人舌鳞癌细胞 Caov-3 人卵巢癌细胞 COLO 201 人结直肠腺癌细胞 D283 人脑髓母细胞瘤细胞 DU4475 人乳腺上皮细胞 EB-3 人伯基特淋巴瘤细胞 H1HeLa 人宫颈癌细胞 HS 683 人脑胶质瘤细胞 J82 人膀胱癌细胞 Jurkat 人急性T淋巴细胞白血病细胞 JurkatE6-1 人急性T淋巴细胞白血病细胞 MDA-MB-175Ⅶ 人乳腺导管癌细胞 MDA-MB-415 人乳腺癌细胞 MDA-MB-435 人乳腺导管癌细胞 MDA-MB-436 人乳腺癌细胞 NCI-H1703 人肺鳞癌细胞 |