传代细胞 *

更新时间：2015-06-05

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ATCC细胞 ,传代细胞 ,BD培养基,菌种,科研抗体

复苏:
1、准备一个茶缸或1000ml的烧坏，内装2/3杯37℃的温水。
2、从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。
3、打开冻存管，将细胞悬液吸到离心管中。
4、1000rpm离心10分钟，弃去上清液。
5、沉淀加10ml培养液，吹打均匀，再离心10分钟，弃上清液。
6、加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中，37℃培养，第二天观察生长情况。
试剂和器材:
器材：液氮罐、冻存管（塑料螺口冻存管或安瓿瓶）、离心管、吸管、离心机等
试剂：0.25％胰酶、培养基、含保护剂的培养基（即冻存液）
附：冻存液配制：
培养基加入甘油或DSMO，使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4℃下保存。

巨噬细胞原代培养
1.实验前三天，向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml（勿注入肠内）。
2.引颈杀死动物，手提鼠尾将全鼠浸入70％酒精中3～5秒。
3.置动物于解剖台上，用针头固定四肢，双手持镊撕开皮肤拉向两侧，暴露出腹膜，但勿伤及腹膜壁。
4.再用70％酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10ml Eagle液注入腹腔中，同时从两侧用手指揉压腹膜壁，令液体在腹腔内充分流动。
5.用针头轻轻挑起腹壁，使动物体微倾向一侧，使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内。
6.小心拔出针头，把液体注入离心管中，250g 4℃离心10分钟，去上清，加10 ml Eagle培养基。
7.计数细胞，每只小鼠可产生20～30×105细胞，其中90％为巨噬细胞。
8.为获取3×105个帖附细胞/平方厘米，需接种2.5×106/ml。
9.为纯化培养细胞，去除其它白细胞，接种数小时后，去除培养液，用Eagle液冲洗1～2次后，再加新Eagle培养液置37℃ CO2温箱中培养。

人低分化肺腺癌细胞 GLC-82细胞货号： 430168 密封培养瓶直角斜颈 TC表面
人小细胞肺癌细胞 NCI-H446细胞货号：430639
培养瓶 25cm2 直角斜颈（正方斜口）透气盖 PS
人胚肺二倍体细胞 KMB-17细胞货号：4489 灭菌独立包装 25ml移液管
人胚肺二倍体细胞 2BS细胞货号：4490 灭菌独立包装
50ml移液管
人胚胎肺成纤维细胞 WI-38细胞货号：430166
培养皿60X15MM TC表面 PS（聚苯乙烯）
人胚胎气管组织来源细胞 CCC-HBE-2细胞货号：431079 培养瓶 175cm2 直角角度颈密封盖 PS（聚苯乙烯）
人胚肺成纤维细胞 CCC-HPF-1细胞货号：431080 直角角度颈透气盖 PS（聚苯乙烯）材质
MRC-5细胞--MRC-5细胞细胞株货号：3524
带盖灭菌单独包装 24孔标准透明板
人胚肺成纤维细胞 MRC-5细胞细胞株货号：430165
培养皿 35X10MM TC表面 PS（聚苯乙烯）
人小细胞肺癌细胞 NCI-H209细胞货号：430167
培养皿100X20MM TC表面 PS（聚苯乙烯）材质
人肺腺癌细胞 Calu-3细胞货号：3516
6孔细胞标准培养板 TC表面单独或单个成套包装
人胚肺转化细胞 SL-1细胞货号：3513 12
孔透明标准板 TC表面灭菌
人支气管上皮样细胞 BEAS-2B细胞货号：3548
48孔板 TC表面灭菌单个包装
人胚肺二倍体细胞 HEL-2细胞货号：430599
培养皿 150X25MM TC表面 PS（聚苯乙烯）材质
人肺鳞癌细胞 NCI-H226细胞货号：430488冻存管 2.0ml 圆底自立式内旋密盖 PP（聚丙烯）材质灭菌大包装硅胶垫圈
人肺转化细胞系 AE1201细胞货号： 430659
冻存管 2.0ml 圆底自立式外旋密盖 PP（聚丙烯）材质灭菌
人胚肺细胞系 KuMA细胞货号： 4485 移液管灭菌独立包装
人胚肺二倍体细胞 HEL-1细胞货号： 4486 移液管灭菌独立包装 PPW
人小细胞肺癌细胞 DMS 153细胞货号：4487
5ml移液管灭菌独立包装
人肺细胞 HLF-a细胞货号：4488 灭菌独立包装
10ml移液管

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