传代细胞

更新时间：2015-07-07

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定期移植法 ATCC细胞,传代细胞
subculturing 亦称传代培养保藏法，指将菌种接种于适宜的斜面培养基上，zui适条件下培养，待得到健壮的菌体后，于4～6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的一种短期菌种保藏方法。

蒸馏水法
preservation in distilled water 指将欲保藏的菌种细胞悬浮于无菌蒸馏水中，密封后置于4～6℃保存的一种菌种保藏方法。

液体石蜡法
preservation in liquid paraffin 亦称矿物油保藏法，定期移植保藏法的辅助方法。指将菌种接种在适宜的斜面培养基上，zui适条件下培养至待得到健壮的菌体后注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于低温（4～6℃）干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。

强化梭菌琼脂培养基】：牛肉膏 10g，蛋白胨 5g，酵母粉 3g，D（+）-葡萄糖5g，淀粉 1g,NaCl 5g ,NaAc 3g，L-半胱氨酸盐酸盐 0.5g，蒸馏水 1.0L，琼脂 15g，121℃湿热灭菌15min。如需要可添加多粘菌素B（0.02g/L).pH6.8±0.2(25℃）

【MRS培养基】：酪蛋白胨 10.0克，牛肉浸取物 10.0克，酵母提取液 5.0克，吐温80 1.0克，磷酸氢二钾 2.0克，七水硫酸镁 0.2克，气水硫酸锰 0.05克，碳酸钙 20.0克，琼脂 20.0克，蒸馏水 1.0升， PH6.8 葡萄糖20.0克，乙酸钠 5.0克，柠檬酸二钠 2.0克
【麦芽汁琼脂】：将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释至10柏林，加琼脂20克/L，溶化后分装。15磅，灭菌30分钟。
【酵母膏琼脂】：Glucose (葡萄糖) 10g Yeast extract (酵母膏) 10g Water (水) 1000ml Agar (琼脂) 15g pH 7.2
【综合马铃薯培养基】：20%Potato extract (马铃薯汁) 1L ，Glucose (葡萄糖) 20g，KH2PO4 3g，MgSO4·7H2O 1.5g，Vitanib B1 (硫胺素) Trace 8mg ， Agar (琼脂) 20g pH 6，20%马铃薯配配制：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸20分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足1000毫升。

－80℃冰箱冻结法 preservation at －80℃
指将菌种悬浮于保护剂中，在－80℃冰箱中冻结保存的一种长期菌种保藏方法。

液氮超低温冻结法
preservation in liquid nitrogen 指悬浮于保护剂中的菌种经程控降温后，移置于－196℃的液氮或－150℃左右的液氮气相中保存的一种长期菌种保藏方法。

真空冷冻干燥法
freeze-drying 指将欲保藏的菌种细胞或孢子悬浮于保护剂中，经预冻后在真空条件下使水分升华，再经真空封存后保存的一种长期菌种保存方法

【麦麸琼脂】： Wheat bran (麦麸) 3.6% (NH4)2HPO4 0.3% K2HPO4 0.02% MgSO4.7H2O 0.01% Agar (琼脂) 2% pH 7.0
【豌豆琼脂】：Glucose (葡萄糖) 1% Peptone (蛋白胨) 0.5% NaCl 0.5% Agar (琼脂) 2.0% Pea infusion (counted by NH2) [豌豆浸汁(以NH2计)] 12-14 mg∕100 pH (before sterilization) [消前] 7.2-7.5 [Note]: Preparetion of pea infusion (豌豆浸汁的制法)
【氧化硫硫杆菌培养基】：(NH4)2SO4 0.3g KH2PO4 3-4g CaCl2 (anhydrous) [无水] 0.25g MgSO4.7H2O 0.5g FeSO4.7H2O 0.001g Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 3.5-4
【苹果酸钙琼脂】：Calium malate (苹果酸钙) 10g K2HPO4 0.5g NH4Cl 0.5g Glycerol (甘油) 10g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
【燕麦粉琼脂】：Oatemeal（infusion）[燕麦粉浸液] 20g Agar （琼脂） 18% Trace element solution （迹量盐溶液）1ml Distilled water up to （用蒸馏水补充至1000毫升） 1000ml pH 7.2 [Note]：Trace element solution (迹量盐溶液)： FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g ZnSO4.7H2O 0.1g Distilled water (蒸馏水) 100ml