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菌种 菌液的制备：
一：取上述培养好的菌种斜面移入接种室或净化工作台，放置室温后, 用接种环取菌苔少许接种置营养肉汤中(10ml/支,已灭菌), 将已接种毕的细菌管置35℃~37℃培养18~24小时，取出备用。一般于冰箱中保存可用两周。
二：取上述培养好的营养肉汤菌悬液（浓菌液）1ml，加到9ml  0.9%无菌氯化钠溶液混匀，为10-1，再取另一只刻度吸管吸取10-1菌液1 ml加到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液混匀，为10-2 ……以此类推，稀释至含活菌数在 50-100 个。用平板计数。
三：此稀释菌液用于试验后加阳性对照，可在一周内使用。 

菌种冻干粉复苏:
一：把冻干菌种管、灭菌1ml 滴管、双碟、镊子、营养肉汤培养基、营养琼脂斜面数支，移入接种室或净化工作台。

二:先用砂轮将冻干菌种安瓶颈部挫出刻痕,再将冻干菌种管外壁用75%乙醇擦 洗消毒、稍干，用75% 乙醇棉擦净，放在灭菌双碟内，待干。点燃酒精灯，将菌种管的封口一端在火焰上，烧灼红热，用灭菌滴管吸取营养肉汤培养基，滴在灼热的菌种管封口一端，使骤冷而炸裂。 
三：取灭菌镊子，在火焰旁，将炸裂的管口打开，放入灭菌双碟内，另取1支灭菌滴管，在火焰旁吸取营养肉汤少许，加至菌种管底部，将冻干菌搅动促使溶解，随即吸出管内菌液，分别接种至营养琼脂斜面及普通肉汤内，并将滴管及菌种管投入消毒液内，将已接种的营养肉汤及营养琼脂斜面进行培养。 

黄曲霉 ATCC28539
噬糖盐红菌 ATCC29252
隐甲藻 ATCC30772
干酪乳杆菌干酪亚种 ATCC334
休哈塔假丝酵母 ATCC34887
停乳链球菌 ATCC35666
昆明链霉菌 ATCC35682
扣囊内孢霉 ATCC36213
马克斯克鲁维酵母 ATCC36534
串珠镰孢 ATCC38946
米曲霉 ATCC42149
树状微杆菌 ATCC4358
潮湿纤维单胞菌 ATCC491
荧光假单胞菌 ATCC49642
水螺菌 ATCC49643
产气肠杆菌 ATCC49701
串珠镰孢 ATCC52539
金黄色葡萄球菌 ATCC6538P
痤疮丙酸杆菌 ATCC6919
鼠李糖乳杆菌 ATCC7469
食油假单胞菌 ATCC8062
粘质沙雷氏菌 ATCC8100
蛾微杆菌 ATCC8365
粪产碱菌 ATCC8750
枯草芽孢杆菌 ATCC9327
空肠弯曲杆菌 ATCC 33291
产气肠杆菌 ATCC13048
金黄色葡萄球菌 ATCC 27217
阴沟肠杆菌 ATCC 13047
阪崎肠杆菌 ATCC 29544
弗氏柠檬酸杆菌 ATCC 43864
肺炎克雷伯氏菌 ATCC 10031
小肠结肠炎耶尔森氏菌 ATCC 23715
热带念珠菌 ATCC 13803

菌种斜面传代操作：
一：培养基应新鲜制备，如斜面已无冷凝水者，不宜再使用。标签上注明菌种名及菌种编号。至冰箱取出的菌种斜面，应在室温放置约30分钟，待温度平衡后再移入接种室或超净工作台。 
二：点燃酒精灯，用左手握住菌种斜面，将管口靠进火焰旁，右手拿接种棒后端，将接种环烧红30秒，随后将全部接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手用无名指、小指及掌部夹住棉塞，拨开棉塞，将接种环伸人管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷却再移至菌苔上，刮去少量菌苔，随即取出接种棒，并将菌种管口移至火焰旁。
三：堵上棉塞，左手将菌种管放下，取营养琼脂斜面1支，照上述操作打开棉塞，将接种环伸入管内至琼脂斜面的低部，由底向上，将接种环轻贴斜面的表面曲折移动，使细菌划在斜面的表面上。
四：取出接种棒，在火焰旁将培养基管棉塞堵上，然后将接种过细菌的接种棒在火焰上烧灼灭菌。 

菌种的培养与保存：大肠杆菌35~37℃培养48小时  金黄色葡萄球菌30~35℃培养48小时 枯草芽孢杆菌30~35℃培养48小时 白色念珠菌23~28℃培养7天 黑曲霉23~28℃培养7天  4.4.2将培养物管自培养箱取出后放人冰箱（2-8℃）保存，一般 2个月转种一次。