为进一步探查B7家族，研究人员分析了一个数据库中的基因，该数据库内的成员都有可能是B7总家族中的组成部分。克隆出B7-H4分子，在计算机上构建出它的3D结构，发现了他们感兴趣的功能部分。
（人Tca-8113细胞 Tca8113细胞    舌鳞癌细胞）（小鼠TM3细胞    小鼠细胞）

接下来，对这个分子进行了改造，分别在培养细胞和活体小鼠中检测其对T细胞的作用。

研究人员之所以进行上述实验是因为实验室正在探查细胞通讯的分子基础以确定免疫系统的不同组成成分是如何在细胞表面彼此交流的。
（小鼠TM4细胞    小鼠细胞）（人ΦA细胞    胚肾细胞）

发生在细胞表面的基本交流包括两个部分：受体与其合作伙伴也就是所谓的配体。这两个部分如何相互作用决定了免疫系统采取什么样的行动。
（人ΦA-GP细胞    胚肾细胞）（小鼠Ca759细胞    乳癌瘤株）

B7-H4是一种非常强大的“负调节因子”，可关闭T细胞。这一点十分重要，因为在某些疾病如癌症中，这种调节因子可能过度活跃。
（小鼠Ca761细胞    乳癌瘤株）（小鼠Ca763细胞    乳癌瘤株）

而在健康细胞中没有负调节因子。这暗示，健康细胞之所以健康是因为它们不含关闭T细胞的B7-H4。

他们的T细胞仍在工作保护着它们。而在肿瘤中，可能存在过多的B7-H4，使T细胞永远处于关闭状态。 
（小鼠L7712细胞    T细胞性白血病瘤株）（小鼠L7912细胞    T细胞性白血病瘤株）

在健康的正常机体中，负调节因子如B7-H4必需被打开。B7-H4似乎是通过组织细胞分裂和增殖这个机制来抑制T细胞的。
（小鼠HP615细胞    肺癌瘤株）（小鼠ZM755细胞    滑膜肉瘤瘤株）

科研人员相信通过发现哪些分子以及哪些配体与免疫系统的开关有关，这项研究将有助于科学家设计出免疫相关疾病的新治疗策略。这个关于B7-H4的新发现使通过操纵免疫系统达到治疗目的的可能性大大增加。 

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C2C12    细胞信息：贴壁细胞    培养基：90%  DMEM高糖    血清：10% 胎牛血清 

C4-2    细胞信息：贴壁细胞    培养基：90%  高糖DMEM    血清：10% 胎牛血清 

C6    细胞信息：贴壁细胞    培养基：F-12K    血清：2.5%胎牛血清+15% horse serum

C8-D1A    细胞信息：贴壁细胞    培养基：90%  高糖DMEM    血清：10% 胎牛血清 

C-33A    细胞信息：贴壁细胞    培养基：90%  MEM    血清：10% 胎牛血清 

C57    细胞信息：贴壁细胞    培养基：90%  高糖DMEM    血清：10% 胎牛血清

c666-1    细胞信息：贴壁细胞    培养基：90%  RPMI 1640    血清：10% 胎牛血清 

C8161    细胞信息：贴壁细胞    培养基：90%  RPMI-1640    血清：10% 胎牛血清 

细胞培养传代操作：【严格遵照无菌操作】 

1、吸出原瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加胰酶（2-3ml0.25%）进行消化；

注意：胰酶消化时把握时间，通常控制在1-2min；

2、镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时去掉胰酶，加4-6ml*培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散；

3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿、瓶中，添加适当的*培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；

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