人胚肺二倍体细胞  2BS细胞株

【目的】
掌握LD50测定方法及计算过程。
【原理】将一定浓度和一定体积的药物，按一定比例灌胃给予小鼠，观察7日，记录不同剂量小鼠的死亡情况，计算半数致死量，以确定药物急性毒性。
【器材】 鼠笼、烧杯、1ml注射器等。
【药品】 普鲁卡因溶液（5个剂量）
【动物】 小鼠
【方法】
1.预试验 模实验剂量范围，找出引起0～100%的估计致死量。
2.正式试验
（1）取小鼠50只，体重20±2g，♀♂各半，随机分为5组，10只/组。
（2）剂量 按等比级数增减，相邻两剂量比值1:0.6～0.9，设4～5个剂量组。
（3）给药 普鲁卡因溶液，ip。5个剂量组。
（4）统计 按改良寇氏法公式进行计算。
LD50=lg-1[Xm-i（∑P-0.5）] (公式1)
Xm：zui大剂量组剂量对数值
i：相邻两组剂量高剂量与低剂量之比的对数(相邻两组对数剂量的差值)
P：各组动物死亡率，用小数表示（如果死亡率为80%应写成0.80）
∑P：各组动物死亡率之总和
n：每组动物数
Sx50= i×  (公式2)
Sx50：logLD50的标准误
X50=logLD50
LD50的95%可信限=log-1（X50±1.96Sx50） (公式3)
LD50的平均可信限=LD50±(LD50的95%可信限的高限-低限)/2 (公式4)
【结果】 填入表11。
表11 各组小鼠用药、死亡情况及有关计算
 
组别 动物数 剂量 对数剂量 死亡率 P 2 其他数据
(n) (mg/kg) （X） （P）
 

细胞库目录表：

人胚肺成纤维细胞MRC-5  
人胚肺成纤维细胞CCC-HPF-1  
人胚胎气管组织来源细胞CCC-HBE-2  
人胚胎肺成纤维细胞WI-38  
SV-40Z转化肺成纤维细胞WI38/VA13  
人胚肺二倍体细胞2BS  
人胚肺二倍体细胞KMB-17  
人肺细胞HLF-a  
人小细胞肺癌细胞DMS 153  
人胚肺细胞 VA13细胞WI-38 VA13亚系 2RA  
人胚肺二倍体细胞HEL-1  
人胚肺细胞系KuMA  
人肺转化细胞系AE1201    
人肺鳞癌细胞NCI-H226  
人胚肺二倍体细胞HEL-2  
人支气管上皮样细胞BEAS-2B  
人胚肺转化细胞SL-1  
人肺腺癌细胞Calu-3  
人小细胞肺癌细胞NCI-H209  
人低分化肺腺癌细胞GLC-82  
人小细胞肺癌细胞NCI-H446  
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H157  
人肺鳞癌细胞NCI-H520  
人肺巨细胞癌高转移细胞株PG-BE1  
人肺巨细胞癌低转移细胞株PG-LH7  
人肺癌细胞A-427  
人低分化肺腺癌细胞SK-LU-1  
人肺支气管癌细胞NCI-H1650  
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H1975  
人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087  
人小细胞肺癌细胞NCI-H2227  
人非小细胞肺癌细胞NCI-H23  
人肺腺鳞癌细胞NCI-H596  
人非小细胞肺癌细胞NCI-H838  
人肺鳞癌细胞LTEP-s  
人小细胞肺癌细胞LTEP-sm  
人肺鳞癌瘤株LTEP-s  
人肺鳞癌细胞NCI-H1703  
人肺鳞癌细胞NCI-H2170  
人非小细胞肺癌细胞NCI-H524  
人肺腺癌细胞SPC-A1  
人肺癌细胞A549  
人非小细胞肺癌细胞H125  

【注意】
1、预试验要摸准药物引起0和100%死亡率剂量的所在范围。
2、正式试验时各剂量按等比级数分组，应避免zui大剂量组的死亡小于80%，zui小剂量组死亡率大于20%，否则改用其他方法计算。
3、室温：20℃为宜。
4、认真观察中毒症状情况。
【思考题】
1、半数致死量（LD50）测定的目的意义如何？
2、半数致死量（LD50）常用的计算方法有哪些？