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合成细胞培养基 合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。它有一定的配方,是一种理想的培养基。目前合成培养基多达10多余种,有的培养基仍在不断进行改良。早期组织培养是利用天然培养基,目前合成培养基已经成为一种标准化的商品,从zui初的基本培养基发展到无血清培养基、无蛋白培养基,并且还在不断发展。合成培养基的出现极大的促进了组织培养技术的普及发展。 基本组分 基本培养基包括四大类物质:无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物。 (1)无机盐:CaCl2 KCl MgSO4 NaCl NaHCO3 NaH2PO4。对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。 人胚肺二倍体细胞 2BS细胞 细胞买一送一 (2)氨基酸:缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型)。它们都是细胞用以合成蛋白质的必需原料,不能由其他氨基酸或糖类转化合成。除此之外,还需要谷氨酰胺(glutamine)。谷氨酰胺具有特殊的作用,对细胞的培养特别重要,能促进各种氨基酸进入细胞膜;它所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的来源,还是合成—磷酸腺苷、二磷酸腺甘和三磷酸腺苷的原料。细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质,谷氨酰胺缺乏可导致细胞生长不良甚至死亡。在配制各种培养液中都应补加一定量的谷氨酰胺。值得注意的是:谷氨酰胺在溶液中很不稳定,故4℃下放置1周可分解50%,使用中单独配制,置-20℃冰箱中保存,用前加入培养液中。
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人肺腺癌细胞 Calu-3细胞 人胚肺转化细胞 SL-1细胞 人支气管上皮样细胞 BEAS-2B细胞 人胚肺二倍体细胞 HEL-2细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H226细胞 人肺转化细胞系 AE1201细胞 人胚肺细胞系 KuMA细胞 人胚肺二倍体细胞 HEL-1细胞 人小细胞肺癌细胞 DMS 153细胞 人肺细胞 HLF-a细胞 人胚肺二倍体细胞 KMB-17细胞 人胚肺二倍体细胞 2BS细胞 人胚胎肺成纤维细胞 WI-38细胞 人胚胎气管组织来源细胞 CCC-HBE-2细胞 (3)维生素:是维持细胞生长的一种生物活性物质,在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶,对细胞代谢有重大影响。脂溶性维生素(A、D、E、K)常从血清中得到补充。水溶性维生素包括牛物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素和B12。维生素C 也是*的,对具有合成胶原能力的细胞更为重要。 (4)碳水化合物:是细胞生命的能量来源,有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖和丙酮酸钠等。体外培养动物细胞时,几乎所有培养基或培养液中都以葡萄糖作为必含的能源物质。
人胚肺成纤维细胞 CCC-HPF-1细胞 MRC-5细胞--MRC-5细胞 细胞株 人胚肺成纤维细胞 MRC-5细胞 细胞株 人小细胞肺癌细胞 NCI-H209细胞 人低分化肺腺癌细胞 GLC-82细胞 人小细胞肺癌细胞 NCI-H446细胞 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H157细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H520细胞 人肺巨细胞癌高转移细胞株 PG-BE1细胞 人肺巨细胞癌低转移细胞株 PG-LH7细胞 人肺癌细胞 A-427细胞 人低分化肺腺癌细胞 SK-LU-1细胞 人肺支气管癌细胞 NCI-H1650细胞 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H1975细胞 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H2087细胞 (5)葡萄糖和谷胺酰胺的合理使用:乳酸是葡萄糖不*氧化的产物。研究表明,体外培养条件下95%的葡萄糖转变为乳酸,这降低了营养物质的代谢效率,降低培养基pH 值,增加渗透压。在氧气供给不足的情况下,NADH 转运系统苹果酸-天冬氨酸穿梭系统活性低而不能将糖酵解产生的NADH氧化磷酸化为NAD+,细胞只得以降低能量需求的方式如激活乳酸脱氢酶将糖酵解产生的丙酮酸与NADH反应生产乳酸和NAD+,从而保证了糖酵解的顺利进行。
人小细胞肺癌细胞 NCI-H2227细胞 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H23细胞 人肺腺鳞癌细胞 NCI-H596细胞 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H838细胞 人肺鳞癌细胞 LTEP-s细胞 人小细胞肺癌细胞 LTEP-sm细胞 人肺鳞癌瘤株 LTEP-s细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H1703细胞 人肺鳞癌细胞 NCI-H2170细胞 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H524细胞 人肺腺癌细胞 SPC-A1细胞 人肺癌细胞 A549细胞 人非小细胞肺癌细胞 H125细胞
另一个可能的解释是连接糖酵解与TCA循环的特异性酶如丙酮酸脱氢酶复合物、磷酸丙酮酸羧化酶激酶和丙酮酸羧化酶活性低下,直接导致糖酵解与TCA循环的失衡。因此体外培养条件下,葡萄糖主要经糖酵解降解,产生过量的乳酸。减少乳酸生产zui常用的方法是限制培养基中葡萄糖的含量,但葡萄糖含量过低可造成细胞营养供应不足,细胞生长抑制。该方法需要对葡萄糖的消耗与需求、乳酸的生产速率以及目的蛋白的表达量等参数进行综合考虑方可应用。
人肺癌细胞 H1299细胞 人肺癌细胞 TKB-1细胞 人肺腺癌细胞,LTEP-a-2细胞 人肺腺癌细胞,Lu-165细胞 人大细胞肺癌细胞,NCI-H460细胞 人肺腺癌细胞,SPC-A-1细胞 人高转移肺癌细胞,095-D细胞 人肺鳞癌细胞,SK-MES-1细胞 人大细胞肺癌细胞,NCI-H661细胞 人肺黏液上皮样癌细胞,NCI-H292细胞 人肺退行性癌细胞,Calu-6细胞 人肺腺癌细胞,NCI-H1395细胞 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H358细胞 在目前常用的培养基中,葡萄糖和谷胺酰胺是体外培养动物细胞的主要能源,其能量代谢通路与体内*不同,表现为葡萄糖主要经糖酵解途径为细胞提供能量,谷胺酰胺大部分通过不*氧化途径,另一小部分通过*氧化为细胞供能。因此,适当的调整细胞内的代谢途径,使之能促进细胞的快速生长和产物合成,同时减少代谢抑制物的生成是行之有效的一种策略。许多动物细胞如CHO、BHK 和杂交瘤细胞对营养物质葡萄糖和谷氨酰胺的消耗利用很快。然而对于细胞生长而言,二者的快速利用并非细胞必需;相反相当一部分转化为代谢废物乳酸和氨,以及一些非必需氨基酸如丙氨酸,脯氨酸。其中,乳酸和氨是两种主要代谢废物,其积累可影响细胞生长以及产品质量。减少这两种代谢产物的积累,是大规模细胞培养技术研究的重要方向。 |