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MTT检测细胞活性的操作方法

一、MTT 是什么
MTT 是一种粉末状化学试剂，全称为 3-(4,5)-dimethylthiahiazo
(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基
四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。
二、MTT 法用来做什么
简单地说：是一种检测细胞存活和生长的方法。
MTT 主要有两个用途
1．药物（也包括其他处理方式如放射线照射）对体外培养的细胞毒性的测定；
2．细胞增殖及细胞活性测定。
MTT检测细胞活性的操作方法 三、为何 MTT 可以用来做上述工作
检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色
结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶
解细胞中的甲瓒，用酶标仪在 490nm 波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT
结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值（OD 值），来判断活细胞数量，OD
值越大，细胞活性越强（如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小）。
 四、实验所需材料
1．MTT 溶液的配制通常 MTT 配成的终浓度为 5mg/ml,须用 PBS 或生理盐水做溶剂。
市面上一般 MTT 的包装为 100mg,250mg 或 1g
1.1 对于 100mg 这样的小包装，厂家都是将 MTT 放入小管中的，个人建议不要再用天平称
量分装，而应该一次性将其全配制成溶液，如 100mg 用 20mlPBS 来溶解。具体做法：预
先在 50ml 离心管（没有的话，可用培养瓶替代）加入 20ml PBS，从中先吸取 500-1000ul
PBS 装入含 MTT 的小管中，吹打若干次后将其移入 50ml 离心管，然后再混匀。可以重复
几次，以使小管中的 MTT 不残留于管内。将 MTT *混匀后，用 0.22μm 滤膜过滤以除去
溶液里的细菌，分装避光(避光袋或是黑纸、锡箔纸包住)可长期保存于-20 度。按细胞培养
板每孔需加 10ul 计算，一般每 96 孔板约需 1ml，所以分装时可考虑每管分装 1ml。
1.2 对于大包装，可按上述方法称取一部分溶解，也有人将粉剂分装在 EP 管里，用的时候
现配，直接往培养板中加。
注意事项：
1. 在配制和保存的过程中，容器用铝箔纸包住。
配成的 MTT 需要无菌，MTT 对菌很敏感
MTT 一般现用现配，过滤后 4 度避光保存两周内（个人曾做过 4 度避光保存 4 周的
MTT 溶液，效果仍然不错）有效，或配制成 5mg/ml 保存在-20 度长期保存，避免反复冻融，
小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。当 MTT 变为灰绿色时就
不能再用。
MTT 有致癌性，用的时候小心,有条件带那种透明的簿膜手套.
2．MTT 甲瓒溶解液
2.1 二甲基亚砜 DMSO，可以直接溶解，无需配制，使用方便，溶解速度快，但对人体毒性
较大，且需去除原培养液，在去除培养液的过程中，可能会把结晶去掉，导致结果不稳定。
2.2 三联溶解液：SDS10g，异丁醇 5ml，10M HCl 0.1ml 用双蒸水溶解配成 100ml 溶液，
该溶解液不需去除原培养基，但溶解较慢。
该溶解液因含有 SDS，在低温保存的时候易产生结晶，因此在用之前必须提前几小时拿至
室温，将 SDS 结晶全部溶解后再使用。

人肺腺癌细胞 Calu-3细胞
人胚肺转化细胞 SL-1细胞
人支气管上皮样细胞 BEAS-2B细胞
人胚肺二倍体细胞 HEL-2细胞
人肺鳞癌细胞 NCI-H226细胞
人肺转化细胞系 AE1201细胞
人胚肺细胞系 KuMA细胞
人胚肺二倍体细胞 HEL-1细胞
人小细胞肺癌细胞 DMS 153细胞
人肺细胞 HLF-a细胞
人胚肺二倍体细胞 KMB-17细胞
人胚肺二倍体细胞 2BS细胞
人胚胎肺成纤维细胞 WI-38细胞
人胚胎气管组织来源细胞 CCC-HBE-2细胞
人胚肺成纤维细胞 CCC-HPF-1细胞
MRC-5细胞--MRC-5细胞 细胞株
人胚肺成纤维细胞 MRC-5细胞 细胞株
人小细胞肺癌细胞 NCI-H209细胞
人低分化肺腺癌细胞 GLC-82细胞
人小细胞肺癌细胞 NCI-H446细胞
人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H157细胞
人肺鳞癌细胞 NCI-H520细胞
人肺巨细胞癌高转移细胞株 PG-BE1细胞
人肺巨细胞癌低转移细胞株 PG-LH7细胞
人肺癌细胞 A-427细胞
人低分化肺腺癌细胞 SK-LU-1细胞
人肺支气管癌细胞 NCI-H1650细胞
人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H1975细胞
人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H2087细胞
人小细胞肺癌细胞 NCI-H2227细胞
人非小细胞肺癌细胞 NCI-H23细胞
人肺腺鳞癌细胞 NCI-H596细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H838细胞
人肺鳞癌细胞 LTEP-s细胞
人小细胞肺癌细胞 LTEP-sm细胞
人肺鳞癌瘤株 LTEP-s细胞
人肺鳞癌细胞 NCI-H1703细胞
人肺鳞癌细胞 NCI-H2170细胞
人非小细胞肺癌细胞 NCI-H524细胞
人肺腺癌细胞 SPC-A1细胞
人肺癌细胞 A549细胞
人非小细胞肺癌细胞 H125细胞
人肺癌细胞 H1299细胞
人肺癌细胞 TKB-1细胞
人肺腺癌细胞，LTEP-a-2细胞
人肺腺癌细胞，Lu-165细胞
人大细胞肺癌细胞，NCI-H460细胞
人肺腺癌细胞，SPC-A-1细胞
人高转移肺癌细胞，095-D细胞
人肺鳞癌细胞，SK-MES-1细胞
人大细胞肺癌细胞，NCI-H661细胞
人肺黏液上皮样癌细胞，NCI-H292细胞
人肺退行性癌细胞，Calu-6细胞
人肺腺癌细胞，NCI-H1395细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H358细胞
人非小细胞肺癌细胞，HCC827细胞
人典型小细胞肺癌细胞，NCI-H1688细胞
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H1299细胞
人胚肺二倍体细胞，2BS细胞
人支气管上皮样细胞，BEAS-2B细胞
人胚肺成纤维细胞，CCC-HPF-1细胞
人胚胎气管组织来源细胞，CCC-HBE-2细胞
人肺腺癌细胞，Calu-3细胞
人小细胞肺癌细胞，DMS 153细胞
人高转移肺癌细胞，95-D细胞
人低分化肺腺癌细胞，GLC-82细胞
人肺细胞，HLF-a细胞
人胚肺二倍体细胞，HEL-1细胞
人胚肺二倍体细胞，HEL-2细胞
人肺癌细胞，H1299细胞
人胚肺二倍体细胞，KMB-17细胞
人胚肺细胞系，KuMA细胞
人肺鳞癌细胞，LTEP-s细胞
人小细胞肺癌细胞，LTEP-sm细胞
人肺鳞癌瘤株，LTEP-s细胞
人胚胎心肌组织来源，CCC-HEH-2细
人脐静脉内皮细胞，HUV-EC-C细胞
人脐静脉内皮细胞（人膀胱癌细胞污染），ECV-304细胞
人胚胎心脏成纤维样细胞，HEH2细胞
人肝癌细胞，BEL-7402细胞
人胚胎肠粘膜组织来源细胞，CCC-HIE-2细胞
人正常肝细胞，L-02细胞
人胰腺癌细胞，PANC-1细胞
人肝癌细胞，Hep G2细胞
人结直肠癌细胞，T84细胞
人胃腺癌细胞，BGC-823细胞
人肝癌细胞，HuH-7细胞
人结直肠腺癌细胞，HCT-8细胞
人结直肠腺癌细胞，HT-29细胞
人结直肠腺癌细胞，COLO 205细胞
人十二脂肠腺癌，HuTu-80细胞
人结直肠腺癌细胞，HCT 116细胞
人结直肠腺癌细胞，LoVo细胞
人胰腺腺泡上皮癌，HPAC细胞
人结直肠腺癌细胞，SW620细胞
人胰腺癌细胞，AsPC-1细胞
人胃癌细胞，MKN-45细胞
人胃腺癌细胞，SGC-7901细胞
人胰腺导管癌细胞，CFPAC-1细胞
人食管癌细胞，EC109细胞
人食管癌细胞，NEC细胞
人结肠腺癌细胞，LS 180细胞
人结直肠腺癌瘤株，HCT 116细胞
人结直肠腺癌细胞，COLO 201细胞
人结直肠癌细胞，DiFi细胞
人肝癌细胞，Hep-3B细胞
人肝腹水腺癌细胞，SK-HEP-1细胞
人肝癌细胞，HHCC细胞
人肝癌细胞，HB611细胞
人胃腺癌细胞，AGS细胞
人胰腺腺癌细胞，BxPC-3细胞
人结肠癌细胞，CW-2细胞
人胆囊癌细胞，GBC-SD细胞
人胆管细胞型肝癌细胞，HCCC-9810细胞
人胃癌细胞（未分化），HGC-27细胞
人食管癌细胞，JAR细胞
人结直肠腺癌细胞，LS 174T细胞
人肝癌细胞，QGY-7701细胞
人肝癌细胞，QGY-7703细胞
人肝癌细胞，SMMC-7721细胞
人涎腺腺样囊性癌细胞，ACC-3细胞
人肝癌细胞，BEL-7404细胞
人肝癌细胞，BEL-7405细胞
人结直肠腺癌细胞，Caco-2细胞