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定期移植法  斜面的制备
  酵母菌保藏一般用5oBé麦芽汁琼脂培养基或YEPD培养基，其它特殊培养基可另行配制。

ATCC细胞,传代细胞,BD培养基,菌种

将斜面放入培养箱中，30℃培养1～3天。无菌落长出后将斜面保存于4℃。空白斜面应尽快使用。
YEPD培养基 
培养基组成 
酵母提取物10g 
蛋白胨 10g 
葡萄糖 20g 
自来水 1000mL 
琼脂 15～20g 
PH值 自然

配制过程
在烧杯中放入约500mL水，按要求称量各种药品，依次放入烧杯中溶解，zui后补足1000mL。
按所述制备空白斜面。 

接种 
打开超净台或无菌间的紫外灯灭菌20～30分钟。关闭紫外灯，用75%酒精擦拭操作台面进行消毒。点燃酒精灯，用75%酒精擦手进行消毒。一只手夹住原菌种平板或试管及待转接斜面试管(斜面朝上)，另一只手将棉塞从试管口拔出，操作应在火焰无菌区域进行。

在火焰上将接种针的金属丝部分烧红灭菌，然后将要伸入试管部分的针柄也反复通过火焰灭菌。将接种针水平通过火焰并插入原菌试管或平皿内，先在管壁上或未长菌体的培养基表面冷却，然后再用接种针轻轻沾取少量菌体，将接种针自原菌种试管或平皿内抽出，抽出时勿碰管壁，也勿通过火焰。

在火焰旁将沾有菌体的接种针迅速伸入待接空白斜面试管内，自斜面底部向上划一直线，使菌体沾附在斜面培养基上。划线时尽量不要划破培养基表面。接完种后将接种针由试管内抽出，同时将试管口在火焰上灼烧一下，塞上棉塞。

注意不要用试管口去迎棉塞，以免试管口在移动时造成污染。 
接种针在放回原处前应在火焰上*灭菌。放下接种针后，再用右手将棉塞进一步塞牢，避免脱落。zui后将已接种好的斜面试管放在试管架上。接种完毕后及时在试管上标明菌株编号和日期，也可在接种之前标明。

培养:将接完种的斜面放入培养箱中，28～30℃条件下进行培养3天。特殊菌种可在其zui适条件下培养至稳定期。

保藏:培养好的斜面于4～6℃保存，根据不同要求每3～6个月移植一次。对于某些菌种，如芽裂酵母，阿舒假囊酵母，棉病囊霉等，必须1～3个月移植一次。

保藏湿度用相对湿度表示，通常为50%～70%。 微生物菌种保藏期间，要定期检查菌种存放设施的温度和湿度、菌株有无污染、棉塞有无霉变，如发现异常应重新移植培养后更换。每株菌种应保藏相继的三代培养物，以便对照，也可减少因意外和污染造成的损失。

菌种的移植:将斜面培养物转接到另一空白斜面上，在适宜条件下进行培养。微生物菌种移植过程，要对菌株编号及培养基分别进行核对，避免发生错误。微生物菌种移植培养后，应与原保藏菌株的培养特征和菌株登记信息对照，检查无误后再存放。

5oBé麦芽汁琼脂培养基
称取一定量的大麦芽粉，加入4倍量温度为60℃的清水，在55℃水浴锅中保温糖化4～6小时，并间歇性搅拌。用玻璃棒蘸一滴糖化液于白色比色盘内与碘液反应，碘呈色反应为无色时糖化完毕。 
用纱布过滤，将滤液煮沸，再用纱布或脱脂棉过滤，得到澄清的麦芽汁。或于糖化液中加入适量蛋清（每500g大麦芽粉的糖化液加入一个鸡蛋的蛋清），煮沸，过滤，也可得到清澈透明的麦芽汁。
用波美计测量麦芽汁浓度（一般为8～10oBé），加水稀释成5oBé的麦芽汁，pH值自然。按1.5%～2%比例加入琼脂，煮沸使琼脂溶解，补足所蒸发水分。
将培养基趁热分装，每管分装量约为试管高度的四分之一（4～5mL）。分装过程中，应注意勿使培养基沾污管口，以免造成污染。
分装好的试管加棉塞或橡胶塞，外面包扎一层牛皮纸并注明培养基名称及配制日期。121℃蒸汽灭菌15～20分钟。灭菌后及时摆放斜面，斜面长度不超过试管管长的二分之一为宜。