细胞:ESC-410细胞 中文名称:人食管癌细胞 生长特性:贴壁 培养基:1640培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清) 冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO ESC-410细胞传代: 1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。 2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时; (可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化) 直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。 3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。 4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。 (网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;) 禽白血病病毒(ALV)核酸扩增检测试剂盒说明书(PCR-荧光探针法 ) 实验目的:适用于检测发病动物羽髓、肝脏、脾脏、淋巴结、骨髓及肿瘤等固体组织、体液以及病毒细胞培养液中禽白血病病毒(ALV) J亚群DNA,适用于禽白血病病毒(ALV) J亚群感染的辅助诊断及流行病学调查,其检测结果仅供参考。 实验原理:用一对禽白血病病毒(ALV) J亚群特异性引物和一条特异性荧光探针, 经过裂解提取DNA,后者在Taq酶作用下,配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分,用PCR-荧光探针法对禽白血病病毒(ALV) J亚群DNA进行扩增,从而达到实时快速定量检测之目的。 实验组成: 核酸提取液B 4管(500ul/管) Taq酶系 1管(80ul/管) ALV PCR MIX 1管(960μl/管) ALV阳性质控品 1管(50μl/管(1×107Ccopies/ml)) 阴性质控品 1管(500μl/管) 实验标本采集: 适用标本类型:发病动物羽髓、肝脏、脾脏、淋巴结、骨髓及肿瘤等固体组织、体液以及病毒细胞培养液。 标本采集: 固体组织标本:取发病动物羽髓、肝脏、脾脏、淋巴结及肿瘤等组织约1g,置入1.5ml洁净EP管,立即送检。 体液及病毒液:取上述标本约1ml,置入1.5ml洁净EP管,立即送检。 血清:无菌条件下取全血2-3ml,转至5ml干燥管或促凝管中,上下颠倒3-5次混匀,密闭送检。 保存和运输:上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃。但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。 |