细胞:GT1-1细胞 中文名称:小鼠垂体瘤细胞 生长特性:贴壁 培养基:1640培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清) 冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO GT1-1细胞传代: 1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。 2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时; (可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化) 直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。 3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。 4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;) 胸膜肺炎放线杆菌(APP)核酸扩增检测结果分析判定: 反应结束后保存检测数据文件。根据分析后图像调节baseline的start值(3-8),stop值(13-18)以及Threshold值,使Std curve 窗口下的标准曲线达到最佳(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值),最后到Reporter窗口下记录仪器自动分析计算出的未知标本数值(Qty-Copies/ml)。 【质控标准】 阴性质控品:全部阴性。 APP-阳性质控品:阳性质控品的 Ct 值均应小于 35.0。 ∣r∣≥0.97(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值)。 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效,全部试验应重新进行。 【结果判定】 测定结果的计算: 如果Ct值﹤38,则实验样品的APP DNA含量(基因拷贝数/ml)= Qty-Copies/ml; 如果38﹤Ct值﹤40,为灰区建议重新检测,重新检测若38﹤Ct值﹤40判为阳性,否则为阴性。 如果Ct值=40,则APP DNA含量(基因拷贝数/ml)﹤5×10P2PCopies/ml (低于检测下限)。
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