细胞:HMEC细胞 中文名称:人乳腺上皮细胞 生长特性:贴壁 培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清) 冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。 HMEC细胞传代: 1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。 2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时; (可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化) 直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。 3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。 4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。 (网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;) 布氏杆菌核酸扩增检测 实验目的:本试剂盒适用于检测猪、牛、羊及人血液、奶等及等淋巴结等组织样本中布氏杆菌(BS)DNA,用于布氏杆菌感染的辅助诊断及流行病学调查。其检测结果仅供参考。 实验原理:用一对布氏杆菌(BS)特异性引物和一条特异性荧光探针,通过碱裂解法提取DNA,后者在Taq酶作用下,配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分,用PCR-荧光探针体外扩增法对布氏杆菌(BS)DNA进行扩增,从而达到快速定量检测之目的。 实验组成: (核酸提取液B 4管 500μl/管)(Taq酶系 1管 80μl/管)(BS PCRMIX 1管 960μl/管) (BS阳性质控品 1管 50μl/管(1×107Ccopies/ml))(阴性质控品 1管 500μl/管) 备注:10×RCLB等另行配备。 质控标准: 阴性质控品:全部阴性。 BS-阳性质控品:阳性质控品的 Ct 值均应小于 35.0。 ∣r∣≥0.97(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值)。 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效,全部试验应重新进行。
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