细胞：HMrSV5细胞 中文名称：人腹膜间皮细胞 生长特性：贴壁 培养基：DMEM-H培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO 收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。 HMrSV5细胞传代： 1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。 2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时； （可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化） 直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。 3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。 4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。 （网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；） 布氏杆菌核酸扩增检测： （适用标本类型：猪、牛、羊及人血液、奶等及等淋巴结等组织样本。） 标本采集： 淋巴结等固体组织：取疑似动物淋巴结约1g组织，置于1.5ml 洁净EP管中送检。 全血：无菌条件下用注射器取疑似动物血3-5ml，转至5ml含有Na2EDTA或枸橼酸na抗凝管中，充分摇匀，密闭送检。 奶：取新鲜奶10ml，转至一洁净的15ml离心管中，密闭送检。 3. 保存和运输：上述标本短期内可保存于4℃，长期保存可置-70℃。但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。 适用仪器：主要包括ABI GeneAmp PCR System7700、ABI GeneAmp PCR System7500、ABI PRISM 7300、LightCycler等毛细管的仪器，MJ Opticon系列或取得资格认证的定量PCR仪。 结果分析判定： 反应结束后保存检测数据文件。根据分析后图像调节baseline的start值（3~8），stop值（13~18）以及Threshold值，使Std curve 窗口下的标准曲线达到最佳（correlation数值介于-0.97~-1之间，correlation数值等同于∣r∣值），最后到Reporter窗口下记录仪器自动分析计算出的未知标本数值（Qty-Copies/ml）。
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