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技术服务
ECC-1细胞培养(人子宫内膜癌细胞)
点击次数:37 更新时间:2024-04-23

细胞:ECC-1细胞

中文名称:人子宫内膜癌细胞

生长特性:贴壁

培养基:1640 培养基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。

ECC-1细胞传代:

1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。

2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;

(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)

直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。

3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

 

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

犬细小病毒(CPV)核酸扩增检测

实验目的:适用于检测犬科动物如狗、貉、狐等动物唾液、呕吐物、粪便、血清或者病死动物心、肠等实质脏器标本中犬细小病毒(CPV)DNA,适用于犬细小病毒(CPV)感染的辅助诊断及流行病学调查。其检测结果仅供参考。

实验原理:选取一对犬细小病毒(CPV)特异性引物和一条特异性荧光探针,应用碱裂解提取犬细小病毒(CPV)DNA,后者在耐热DNA聚合酶(Taq酶)作用下,配以FQ-Buffer(内含MgP2+P、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体(dNTPs)等成分,通过PCR-荧光探针法对犬细小病毒(CPV)进行体外扩增,从而达到实时快速定量检测之目的。

实验组成:

(核酸提取液B 4管 500μl/管 )(Taq酶系 1管 80μl/管 )(CPV–PCR MIX 1管 960μl/管)

(CPV阳性质控品 1管 50μl/管(1×10P7Copies/ml))(阴性质控品 1管 500μl/管)

备注:病毒浓缩液等另行配备。

【质控标准】

阴性质控品:全部阴性。

CPV阳性质控品:阳性质控品的 Ct 值均应小于 35.0。

∣r∣≥0.97(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值)。

 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效,全部试验应重新进行。



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