种细胞的筛选是为细胞次生产物生产提供高产细胞系的中间环节，为了获得一致的细胞产量和产物产量，根据不同的植物和产物类型，有不同的筛选方法。其基本操作是单细胞平板培养。
a. 将细胞悬浮系在上述培养基和培养条件下，每隔7天继代一次，每次按细胞悬液与新鲜培养基1:5的比例接种；
b. 将新鲜配制的琼脂培养基在未凝固前，与处于对数生长期的细胞悬浮液按4:1混合后，平铺在培养皿中，操作时特别注意温度不能过高，以免给细胞造成伤害。如果悬浮系中的有过大的细胞团，需过滤除去大的细胞团。
c. 在细胞分裂形成可见的小愈伤组织时，将单个细胞的愈伤组织分别接种在平板培养基上单独培养，由每个细胞形成的愈伤组织即为一个细胞系（clone）。
d. 待愈伤组织长至能检测成分的大小时，取每个愈伤组织的一半用于成分分析，另一半继续培养。成分分析完成后，淘汰不符合要求的愈伤组织，对复合要求的愈伤组织扩大繁殖。
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About细胞冷冻保存温度
冷冻保存温度是指能长期保存细胞的超低温度，在此温度下，细胞生化反应极其缓慢甚至停止，但经过长期保存，在复苏后仍能保持正常的结构和功能。
不同的细胞和生物体以及使用不同的冷冻保存方法要取得同样的冷冻保存效果，冷冻保存温度可以不同。但从实际和效益的观点出发，液氮温度（-196℃/）是 目前*的冷冻保存温度。在-196℃/时，细胞的生命活动几乎*停止，但复苏后细胞的结构和功能完好。如果冷冻过程得当，一般生物样品在-196℃/下均可保存十年以上。应用-70℃/～-80℃/保存细胞，短期内对细胞的活性无明显影响，但随着冻存时间延长，细胞存活率明显降低。在冰点到-40℃/范围内保存细胞的效果不佳。
方法
非玻璃化冻存是利用各种温级的冰箱分阶段降温至-70℃～-80℃，然后直接投入液氮进行保存；或者是利用电子计算机程控降温仪以及利用液氮的气、液，按一定的降温速率从室温降至-100℃以下，再直接投入液氮保存的方法。以该种方法冻结的细胞悬液或多或少都有冰晶的形成。
1.待冻存细胞悬液的制备
（1）按常规方法消化处于对数生长期的细胞培养物，制备单细胞悬液，并计算细胞总数；
（2）将细胞悬液以800～1000r/min离心5min，去上清夜；
（3）向细胞沉淀物中加入冷冻保护液，轻轻吹打混匀，使细胞密度达1×106～1×107个/ml；
（4）按每管1～1.5ml的量分装于冻存管内，拧紧管盖；
（5）再冻存管上做好标记，包括细胞代号及冻存日期。
2.分级冷冻
（1）先将冻存管放入普通冰箱冷藏室（4～8℃），约40min；
（2）接着将冻存管置于普通冰箱冷冻室（-10℃～-20℃），约30～60min；
（3）将冻存管转入低温冰箱（-30℃），放置30min左右；
（4）然后将冻存管转移到超低温冰箱（-70℃～-80℃），过夜；
（5）zui后将冻存管投入液氮保存。
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更新时间：2013-11-14 
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