上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中长混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键。 体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜,因此培养在有胶原的底物上可能利于生长,另外人或小鼠表皮细胞培养在以3T3细胞为饲养层(用射线照射后)时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2+含量和温度,向培养基中加入表皮生长因子,均有利于表皮细胞生长。 以表皮细胞为例,用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞,方法如下: 1、 取材:外科植皮或手术残余皮肤小块,早产流产儿皮肤更好,去角化层薄者,切成0.5-1平方厘米小块。 2、置0.02%EDTA中,室温,5分钟。 3、换入0.25%胰蛋白酶中,4摄氏度过夜。 4、分离:取出皮块,用血管钳或镊子将表皮与层分开。 5、取出表皮,剪成更小的块后,置0.25&胰酶中,37摄氏度,30-60分钟。 6、反复吹打,制成悬液。 7、培养:用80目不锈钢纱网滤过后,低速离心,吸去上清。 8、直接加入培养基制成细胞悬液,接种入培养瓶,CO2温箱培养。 通派生物(上海)细胞库:国内/外细胞供应,种类齐全,质量保证,,100%放心免费售后! 自细胞库成立至今,供应于全国各省市地区,拥有北京/深圳中科院/研究所,协和,瑞金,清华等各大小型院校及企业。一心服务广大师生顺利实验研究,并给予适当,受到大家长期以来的信任和亲睐,更多合作项目正在准备启动中。 细胞库始终秉持诚实守信、非盈利为目的地争取努力做到快速、效率、及时、地完善产品服务,满足客户们的多类需求。 更多细胞/菌种名称查询订购请在线客服,或细胞库管理员(苏欣:)索要详细说明! |